19.如图是我国利用基因工程方法生产人生长激素的示意图.图中的质粒是基因工程中常选用的栽体一pBR322质粒,ampR表示青霉素抗性基因,tetR表示四环素抗性基因,限制酶PstI、EcosRI和HindX切割形成的末端均不相同.据图回答下列问题:
(1)为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,③过程采用的酶是PstI酶和EcoRI酶,④过程采用的酶是DNA连接酶,它作用的化学键为磷酸二酯键.
(2)为了提高⑤过程的成功率,常用CaCl2溶液处理大肠杆菌.作为受体的大肠杆菌细胞内,应不含青霉素抗性基因和四环素抗性基因,以利于筛选出含重组质粒的受体菌.
(3)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等,则形成的DNA片段有6种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占$\frac{1}{6}$.
(4)按照图示的操作,将三角瓶中的大肠杆菌先接种到甲培养基上,然后分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置,一段时间后,菌落的生长状况如图所示.接种到甲培养基上的目的是筛选含四环素抗性基因的大肠杆菌.
(5)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程不能,原因是人的皮肤细胞内存在生长激素基因,但由于基因的选择性表达,人的皮肤细胞内不能合成生长激素mRNA.
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