2.微生物诱变后的筛选环节极为繁杂,定向筛选常用来筛选营养缺陷型突变株.无氮MM培养基(基本培养基)仅能满足野生型菌株生长需要,该培养基中营养缺陷型菌株能存活但不能繁殖.CM培养基(完全培养基)可满足营养缺陷型菌株营养需要.已知青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成.据图回答下列相关问题:
(1)据培养结果推测:1培养皿中是CM(或完全)培养基,2培养皿中是MM(或基本)培养基,MM培养基浓缩缺陷型后需洗涤和稀释,才能涂平板进行母皿CM培养,假设只进行10-1,10-2和10-3三级梯度稀释,简述获得第三级梯度10-3的操作步骤:从10-2稀释液中取样1mL,加9 mL无菌水摇匀,弃去1 mL,即是10-3梯度.
(2)诱变后筛选出的营养缺陷型菌株是在MM培养基上不生长,在CM培养基上能生长的菌落.为验证该菌株是营养缺陷型,可以将菌株再次接种在MM和CM培养基,对比生长状况.
(3)MM培养基加青霉素的目的是抑制细菌细胞壁的生物合成,用于淘汰野生型菌株,加青霉素后培养能浓缩缺陷型的原因是青霉素能抑制细胞壁的合成,野生型因能在MM培养基繁殖而被杀死(营养缺陷型因不能在MM培养基繁殖而被保留).
(4)无氮MM培养基培养2小时的目的是保证诱变出的营养缺陷型不繁殖,防止营养缺陷型因分裂遭误杀(或耗净营养缺陷型在CM培养基中吸收的营养物质).
1.膜泡是细胞中一种重要细胞结构,但由于其结构不固定,因而不能称之为细胞器.细胞内部产生的蛋白质被包裹于膜泡形成囊泡,囊泡具有准确的转运物质的调控机制,它能在正确的时间把正确的细胞“货物”运送到正确的目的地.
(1)膜泡的形成,充分体现了生物膜的结构特点是具有流动性,膜泡是由单层膜所包裹的膜性结构,其基本支架是磷脂双分子层,动物细胞中能产生膜泡的结构一般有内质网、高尔基体、细胞膜.
(2)囊泡上有一个特殊的VSNARE蛋白,它与靶膜上的受体蛋白结合形成稳定的结构后,囊泡和靶膜才能融合,从而将物质准确地运送到相应的位点,这说明膜融合具有特异性性,该过程需要(填“需要”或“不需要”)消耗能量.
(3)如果囊泡转运系统受到干扰,则会对有机体产生有害影响,并导致如糖尿病等疾病的发生,这种类型糖尿病发病的机理是可能是胰岛素合成过程(环节)有问题或者胰岛素作用的靶细胞对胰岛素不敏感外,还有可能胰岛素合成后囊泡运输出现障碍,胰岛素不能准确释放到目的位置,也可能会患糖尿病.
(4)为了确定参与膜泡运输的基因(sec基因),科学家筛选了两种酵母突变体,这两种突变体与野生型酵母电镜照片差异如表:
酵母突变体与野生型酵母电镜照片的差异
sec12基因突变体突变体细胞内内质网特别大
sec17基因突变体突变体细胞内积累大量的未融合小泡
据此推测,sec12基因编码的蛋白质的功能是与内质网小泡的形成有关.sec17基因编码的蛋白质的功能是参与膜泡(或“小泡”)与高尔基体的融合.
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