15.某研究性学习小组利用荧光素-荧光素酶生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量,以研究人参细胞能量代谢的特点.
【实验原理】荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,进行反应发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;当荧光素和荧光素酶都足量时,在一定范围内,ATP的含量与发光强度成正相关.
【实验步骤】
一,ATP的提取:称取一定量的人参愈伤组织,研磨后沸水浴10min,冷却至室温,离心,取上清液.
二,ATP的测定:吸取一定量的上清液,放入分光光度计反应室内,并注入适量的所需物质,在有氧等适宜条件下进行反应,记录发光强度并计算ATP含量.请回答:
(1)步骤一中的沸水浴处理,使酶的空间结构被破坏而失活.
(2)步骤二中记录实验结果为发光强度,分光光度计反应室内能量的转换形式是化学能转化为光能.
(3)荧光素酶价格昂贵,为能准确测定出ATP的含量,又能节省酶的用量,学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”,实验结果如图.
①研究小组配制了1×10-8mol/LATP标准液、70mg/L荧光素溶液(过量)和浓度分别为0、10、20、30、40、50、60mg/L荧光素酶溶液进行实验.
②结果分析:该实验的自变量为荧光素酶浓度,图中e点对应的荧光素酶浓度是最佳的酶浓度,图中e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,这是因为ATP全部水解(或ATP数量限制).
(4)ATP测定对食品卫生监控有重要意义.食品卫生检验人员利用上述生物发光法测定某熟食品样品中细菌的ATP总含量,测算出了细菌的数量,从而判断食品污染程度.做出上述判断的理由是:每个细菌细胞中ATP的含量大致相同(且相对稳定).
 0  123753  123761  123767  123771  123777  123779  123783  123789  123791  123797  123803  123807  123809  123813  123819  123821  123827  123831  123833  123837  123839  123843  123845  123847  123848  123849  123851  123852  123853  123855  123857  123861  123863  123867  123869  123873  123879  123881  123887  123891  123893  123897  123903  123909  123911  123917  123921  123923  123929  123933  123939  123947  170175 

违法和不良信息举报电话:027-86699610 举报邮箱:58377363@163.com

精英家教网