本研究构建重组质粒时看选用四种限制酶，其识别序列如下图，为防止酶切片段的自身环接，可选用的限制酶组合是（ ）

.①② B.①③ C.①① D.③④

GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：

经XhoⅠ酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。泳道显示所鉴定的载体是正向连接的图中第（ ）

A．① B．② C．③ D．②③

进行生物工程设计时，下表各组所选的实验材料与实验目的配置错误的是（ ）

A．1 B．2 C．3 D．4

应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。下图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中不正确的是（ ）

A．图中①～⑤过程中不都发生了碱基互补配对现象

B．图中①过程需要的工具是限制酶和DNA连接酶

C．将PrG导入细胞Ⅱ，则Ⅱ最可能是浆B细胞

D．图中⑤过程需要的培养基中一定含有植物激素和无机养料

将人、鼠细胞悬液混合并诱导细胞融合（只考虑细胞两两融合）后，在HAT培养基上，同时含有T、H基因（独立遗传）的细胞才能存活和增殖。增殖过程中，细胞内人染色体随机丢失，只残留一条或几条。对处于分裂中期细胞的镜检结果如下表。下列叙述正确的是

A．在HAT培养基上，融合细胞均能存活和增殖

B．可以确定①的基因组成为TTTTHHhhhh

C．可以确定①②③的相关基因组成相同

D．可以将T（t）基因定位于人第17染色体

某实验室做了如图所示的实验研究．下列相关叙述中正确的是（ ）

A．与纤维母细胞相比，过程①形成的诱导干细胞的全能性较低

B．单克隆抗体不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外

C．每个Y细胞只产生一种抗体，故过程④不需进行筛选

D．过程②是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程

下图示“番莉一马铃薯”杂种植株的培育过程，其中①〜⑤表示过程，字母表示细胞、组织 或植株。下列说法正确的是（ ）

A、过程①需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的低渗溶液中

B、过程②要用聚乙二醇等方法诱导原生质体融合，主要依据细胞膜具有选择透过性原理

C、过程④⑤需要根据生长发育进程更换不同的培养基

D、最终得到的植株相对于番茄和马铃薯而言发生了染色体数量变异，不具有可育性

微生物的抗性突变是自发产生的？还是与相应的环境因素有关？有人设计下列实验，以研究探讨该问题。实验选用对链霉素敏感的大肠杆菌K12。培养基3、7、11中含有链霉素，其它培养基中不含链霉素。请据实验回答：

（1）将原始对链霉素敏感大肠杆菌K12菌种涂布在培养皿1的表面培养，接着通过右图“印章”将培养皿1中的菌群“印”在培养皿2、3上培养。“印章”位置保持不变。上述不含链霉素培养基通常使用的是 ，据功能，培养皿3是 培养基。“印章”使用前需作 处理。

（2）培养基2中的菌落是 ，培养基3中的菌落是 。

（3）培养基3的A点处有菌落生长，将培养基2中相应的A点位置的菌落上挑出少量移入培养基4中。如图反复几次实验。请根据实验现象解释“微生物的突变是自发的还是环境因素导致的”： 。培养液4、8中的菌液越来越少，但培养皿7、11中的菌落越来越多。原因是： 。

（4）要分离出单个菌落，除了本实验中的涂布法外，还可以用___________法。

（5）现有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质G，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如表所示．根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是 。

（+ ：表示生长 - ：表示不生长）

分析有关科学探究的资料，回答下列问题。

我国科学家屠呦呦因在青蒿素方面的研究获2015年诺贝尔生理医学奖。菊科植物青蒿中所含的青蒿素是目前治疗疟疾的新型特效药。研究者做了相关的实验研究如下。

【实验一】从青蒿中提取青蒿素

【实验结果】相关实验数据如表1和表2所示。

【实验二】生物工程合成青蒿素

为避免青蒿被过度采集，研究者采用生物工程的方法生产青蒿素。但直接从愈伤组织和细胞培养提取青蒿素的效果很不理想，因而采取如下图中①～④所示实验流程合成青蒿素。其中发根农杆菌具有Ri质粒，可促进青蒿愈伤组织生根。

（1）提取青蒿素应选取的最佳青蒿材料是 。据表1和表2分析，实验一的实验目的不包括 。

A．不同生长期青蒿中的青蒿素含量

B．不同青蒿组织中的青蒿素含量

C．不同干燥方式对青蒿素提取的影响

D．不同日照时长对青蒿素含量的影响

（2）实验二图中青蒿组织培养通常用的培养基名称是 培养基。步骤③青蒿叶片组织加入抗生素的作用是 。

（3）据实验二分析，下列相关叙述正确的是________（多选）

A．未分化的青蒿组织中青蒿素含量高 B．该实验是从青蒿根中提取青蒿素

C．Ri质粒转化青蒿属于微生物基因工程 D．利用此生物工程方法可大量生产青蒿素

【实验三】植物激素对青蒿素含量的影响

萘乙酸 （NAA）是最常用来调控发根生长及代谢中间产物形成的一种激素。研究者假设NAA能促进青蒿愈伤组织发根，并能提高青蒿发根后产生青蒿素的含量。实验结果见下表3。

表3： NAA对青蒿组织发根和产生青蒿素的影响

（注：发根生长比指的是：收获时鲜重/接种量）

（4）实验三培养时影响青蒿素含量的可能因素有_________________ （写出2种即可）。

表3中①表示的数值是 。

（5）根据实验三结果，请画出发根生长比与NAA浓度的关系曲线图。

（6）由实验三可得出的结论是：

① 。

② 。

“胰岛素 A、B 链分别表达法”是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程（融合蛋白A、B 分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素 A、B链融合的蛋白）。请回答下列问题：

（1）图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是 。

（2）图1中启动子是 酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是 。

（3）构建基因表达载体时必需的工具酶有 。

（4）β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，推测其意义在于 。

（5）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A 链或 B 链，且β-半乳糖苷酶被切成多个肽段，推测这是因为 。