10.埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
(1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA逆转录成DNA要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
(2)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有抗原性.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的(乳腺蛋白基因的)启动子,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺(房)生物反应器.
(3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将内细胞团均等分割.转基因牛是否培育成功,可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测.
(4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是特异性强、灵敏度高、并可能大量制备,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
9.干扰素是抗病毒的特效药,干扰素基因缺失的个体,免疫力严重下降.科学家利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗.根据所学的知识,回答以下问题:
(1)干扰素的作用机理是:干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体,激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白,其中有些蛋白可通过激活RNA(水解)酶使病毒的RNA水解.
(2)ES细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的-类细胞,这类细胞在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显等胚胎细胞的特性.
(3)将经过修饰的腺病毒与干扰素基因重组形成的基因表达载体转移到ES细胞中,再筛选出成功转移的细胞进行扩增培养.对改造的ES细胞进行培养的过程中,为防止细菌的污染,可向培养液中添加一定量的抗生素;培养液应定期更换,其目的是防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成影响;当细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制,此时在培养瓶内会形成单层细胞.最后将培养的ES细胞输入到患者体内,这种基因治疗方法称为体外基因治疗.
(4)由于干扰素在体外保存困难,可利用蛋白质工程对干扰素进行改造,基本途径是:预期蛋白质功能→设计预期蛋白质的结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核甘酸序列.
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