Question

10．埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别．请回答下列问题：
（1）基因疫苗指的是DNA疫苗，要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病原体的RNA，并将RNA逆转录成DNA要大量获得表达特异抗原的基因，可采用PCR技术进行扩增．
（2）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性．为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，才能驱动转录过程．这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺（房）生物反应器．
（3）为了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚进行操作．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割．转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测．
（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是特异性强、灵敏度高、并可能大量制备，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因等．目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法．检测转基因生物目的基因是否表达--抗原-抗体杂交技术．
2、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体．

解答 解：（1）RNA在逆转录酶的催化下，逆转录成相应的DNA．要大量获得表达特异抗原的基因，可采用PCR扩增方法，体外大量增殖．
（2）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性．为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，才能驱动转录过程．这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺（房）生物反应器．
（3）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚进行操作．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割．转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测．
（4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，筛选后进一歩培养的是杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生单一抗体，又能在体外快速增殖．可以用杂交瘤细胞产生的抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒．
故答案为：
（1）逆转录成DNA
（2）抗原性     （乳腺蛋白基因的）启动子       乳腺（房）生物反应器
（3）桑椹胚       内细胞团均等分割      抗原-抗体杂交
（4）B淋巴细胞        特异性强、灵敏度高、并可能大量制备

点评 本题考查基因工程和单克隆抗体的制备有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论．