9.肺细胞中的let-7基因表达减弱,癌基因RAS表达增强,会引发肺癌.研究人员利用基因工程技术将let-7基因导入肺癌细胞实现表达,发现肺癌细胞的增殖受到抑制.该基因工程技术基本流程如图1.

请回答:
(1)进行过程①时,需用限制性核酸内切酶(或限制)酶切开载体以插入let-7基因.进行过程②时,需用胰蛋白酶处理贴附在培养皿壁上的细胞,以利于细胞培养.
(2 )研究发现,let-7基因能影响癌基因RAS的表达,其影响机理如图2.据图分析,可从细胞提取RNA进行分子杂交,以直接检测let-7基因是否转录.肺癌细胞增殖受到抑制,可能是由于细胞中RAS蛋白(RASmRNA/RAS蛋白)含量减少引起的.
(3)现有一长度为为1000碱基对(bp)的DNA分子,用限制酶切开后得到仍是长度为1000bp的DNA分子,说明此DNA分子形态为环状.
(4)某线性DNA分子分别用限制酶HindⅢ和Sma I处理,然后用这两种酶同时处理,得到如下片段(kb为千个碱基对):
限制酶   片段及长度
HindⅢ    2.5kb,5.0kb
Sma I    2.0kb,5.5kb
HindⅢ和Sma I    2.5kb,3.0kb,2.0kb
可以推知限制酶HindⅢ和Sma I在此DNA分子中分别有1个识别序列.两酶同时处理后得到的片段,再用限制酶EcoR I处理,结果导致凝胶上3.0kb的片段消失,产生一种1.5kb的新片段;那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I将该线性DNA分子进行切割,则可得到长度分别为1.5、2.5、3.5的片段.
 0  118918  118926  118932  118936  118942  118944  118948  118954  118956  118962  118968  118972  118974  118978  118984  118986  118992  118996  118998  119002  119004  119008  119010  119012  119013  119014  119016  119017  119018  119020  119022  119026  119028  119032  119034  119038  119044  119046  119052  119056  119058  119062  119068  119074  119076  119082  119086  119088  119094  119098  119104  119112  170175 

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