4.转基因克隆猪已经在我国培育成功.研究组首先从猪胎儿皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养.通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆.接着,将重组胚胎移入代孕母猪体内,最终获得转基因克隆猪.请回答:
(1)在对纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防止培养过程的污染.此外,应定期更换培养液,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害.
(2)基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒,在基因工程中需要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶,筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的标记基因,标记基因的作用是检测目的基因是否导入受体细胞.
(3)在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集卵母细胞,并在体外培养成熟.然后将转基因纤维细胞注入到去核卵母细胞中,再经过一系列过程获得含有目的基因重组胚胎.检测目的基因是否整合到纤维细胞DNA分子上可采用DNA分子杂交技术.
(4)为了提高重组胚胎的利用率,可以对处于桑椹胚或囊胚阶段的胚胎进行均等分割.将重组胚胎移入到受体子宫后,由于受体子宫不会对外来胚胎发生免疫排斥,并能与之建立正常的生理和组织上的联系,因此,重组胚胎能在受体子宫中继续发育成转基因克隆猪.
(5)生态系统内即使某个物种由于某种原因而死亡,也会很快有其他物种占据它原来的生态位置,从而避免系统结构或功能失衡.这最主要体现了生态工程的物种多样性原理(只填一项).
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