2.凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶.研究人员运用基因工程技术,将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达.下图是基因工程中获取目的基因和构建重组质粒过程,请回答有关问题:
①科学家已经测出该酶的氨基酸序列,因此可以通过化学合成方法来获取目的基因.获得目的基因后,常利用PCR技术在体外将其大量扩增.
(1)分析上图可知,构建重组DNA分子(如图所示)最好选用BamHI和PstI限制酶,理由是提高重组DNA分子的比例(防止自身的黏性末端连接和防止目的基因与载体反向连接).
(2)工业化生产过程中,最初多采用重组大肠杆菌或芽孢杆菌生产凝乳酶,将目的基因导入大肠杆菌或芽孢杆菌前所做的处理方法是Ca2+处理细胞,使之转化为感受态细胞.现在生产凝乳酶多采用重组毛霉或重组的酵母菌,毛霉或酵母菌作为受体细胞的优势是含有的内质网和高尔基体可对蛋白质进行加工和修饰.
(3)研究发现,如果将该凝乳酶20位和24位氨基酸改变为半胱氨酸,其催化能力将提高2倍.科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是蛋白质工程;该生物工程技术的实质是基因工程的延伸(或在基因工程基础上,延伸出来的第二代基因工程).
(4)转基因技术和细胞工程在动植物都有广泛应用,但是,胚胎工程只是指对动物的配子或早期胚胎所进行的多种显微操作和处理技术.
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