18.丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物,其作用机制之一是诱导细胞凋亡.以下是相关的实验研究过程及结果:
实验材料:人肝癌细胞(HepG2),培养液,0.02%二甲亚砜溶液,用0.02%二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液,培养瓶等.
①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液,分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中;将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中培养24h,静置、去掉上清液;
②分别加入等量的0.02%二甲亚砜溶液,用0.02%二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液,再加入等量的培养液,于37℃、5% CO2培养箱中继续培养;
③培养72h,每24h用细胞计数仪检测癌细胞数.
(1)请完善上述实验步骤中相关内容.分别加入等量的0.02%二甲亚砜溶液,用0.02%二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液
(2)本实验的自变量是丹参酮的浓度与作用时间.
(3)设对照组癌细胞增殖率为100%,用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率:增殖率(%)=[$\frac{(用药组各时段癌细胞数用药组开始癌细胞数)}{(对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数)}$]×100.得到以下数据:
表1 丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响 (%)
组别培养时间/h
244872
对照组100100100
给药组
ug/mL
0.5786248
1.0682621
1.548125
①请将表中前48h的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图.
②通过数据和柱形图分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是:丹参酮浓度越高,对细胞生长的抑制作用越强;作用时间越长,对细胞生长的抑制作用越强.
(4)将培养48h的培养液离心,去除上清液后经过一系列的处理及分析,得到对照组和给药组48h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量如表所示:
表2 丹参酮对HepG2细胞周期、凋亡率及凋亡蛋白基因Bax和Bcl-2的表达的影响
组别G1SG2+M凋亡率BaxBcl-2
对照组55%36%9%5.6%28%53%
实验组67%24%9%32.6%37%38%
据此推测,丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于G1期.丹参酮可能通过促进HepG2内Bax基因的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长.
(5)顺铂(DDP)是一种DNA损伤药物,也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物.若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响,应还需设置顺铂用药组和丹参酮联合顺铂用药组给药组才能得出结论.
 0  117319  117327  117333  117337  117343  117345  117349  117355  117357  117363  117369  117373  117375  117379  117385  117387  117393  117397  117399  117403  117405  117409  117411  117413  117414  117415  117417  117418  117419  117421  117423  117427  117429  117433  117435  117439  117445  117447  117453  117457  117459  117463  117469  117475  117477  117483  117487  117489  117495  117499  117505  117513  170175 

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