17.骨骼肌的生理活性随离体时间延长逐渐减弱.研究者为了确定离体骨骼肌再植的合理条件,采用生物荧光法测定离体后骨骼肌每间隔1h骨骼肌中ATP的含量,以判断骨骼肌的生理活性状况.
实验材料与用具:室温下(18-20°C)保存的兔前肢的骨骼肌、荧光素酶缓冲液、荧光素酶-荧光素粉剂、不同离断时间后的骨骼肌样本、生物发光计.
(说明:①在有氧气和ATP的条件下,荧光素酶能催化荧光素的氧化而发出荧光;②生物荧光法测定ATP含量的具体方法不作要求)
一、实验思路①绘制ATP标准荧光发光曲线(见图):
②测定骨骼肌样本液中ATP随时间下降百分比值:将在适宜的氧浓度条件下,离体后15min骨骼肌中ATP荧光发光量作为对照组.每隔1h测定适宜氧浓度和缺氧下,不同离体时间骨骼肌样本的ATP发光量.再分别与对照组相比,得其比值.③统计、分析所得数据.请回答
(1)补充完善实验思路
(2)预测实验结果(设计一个坐标系,并绘制缺氧和适氧条件下,预测的ATP比值变化曲线)
(3)分析与讨论①该实验中可以用ATP荧光发光量代表ATP含量的主要原因是从图1可知,ATP含量与荧光发光量是正比关系.②随着缺血、缺氧时间的延长,需氧呼吸经柠檬酸循环和电子传递链释放的能量减少,ATP生成减少,质膜上载体参与的主动转运过程受阻,引起细胞坏死.
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