10.GDNF是一种神经营养因子.对损伤的神经细胞具有营养和保护作用.研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究.请回答:

(1)完成图中A过程必需的工具是限制酶和DNA连接酶;该基因治疗的受体细胞为神经干细胞.
(2)若要构建含GDNF基因的表达载体,则需选择图21中的XhoⅠ限制酶进行酶切.
(3)限制酶XhoI和限制酶HpaI的识别序列及切割位点分别是-C↓AATTG-和-G↓AATTC-.如图2表示四种质粒,其中,箭头所指部位为酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因.适于作为图示GDNF基因运载体的是A.

(4)下列有关限制性核酸内切酶和质粒运载体的描述,错误的是ABD(多选).
A.限制性核酸内切酶能识别DNA、切割DNA任一序列
B.限制性核酸内切酶的作用部位与RNA聚合酶的相同
C.使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解
D.质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的
(5)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为2个,反向连接的重组载体产生片段有②⑥(多选).
1100bp  ②200bp  ③600bp   ④700bp  ⑤6000bp  ⑥6500bp.
 0  114818  114826  114832  114836  114842  114844  114848  114854  114856  114862  114868  114872  114874  114878  114884  114886  114892  114896  114898  114902  114904  114908  114910  114912  114913  114914  114916  114917  114918  114920  114922  114926  114928  114932  114934  114938  114944  114946  114952  114956  114958  114962  114968  114974  114976  114982  114986  114988  114994  114998  115004  115012  170175 

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