天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用．研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精．请回答下列问题：
（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是，用将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子，以完成工程菌的构建．
（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌，可采用的检测方法是；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用检测．将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围（选会或不会）出现透明圈，则证明培养成功．
（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或，后者的形状成．
（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率，所以在转化后通常需要进行操作．
（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和氨基酸序列上是（选相同或不同）的，这说明．

如图2表示我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的具体培育过程．

请据图回答下列问题：
（1）上述过程涉及的现代生物工程技术，属于分子水平的是，其核心步骤是
．
（2）构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图1中的处，DNA连接酶作用于处．（填“a”或“b”），b箭头指的是，PCR过程断裂此键用．
（3）若要获得单个的成纤维细胞进行培养，需用处理猪胚胎的部分组织．
（4）E过程中若要获得大量的卵母细胞需用激素处理成年母猪．
（5）H过程的名称是，所选择的胚胎一般处于期较合适．
（6）经过培养得到早期胚胎后可以用胚胎分割技术以获得更多基因型相同/不相同）的转基因克隆猪胚胎，且在进行H过程之前，需要对代孕母猪进行处理，以给早期胚胎移入受体提供相同的生理环境．

如图表示一项重要生物技术的关键步骤，字母X可能代表（　　）

地中海贫血症属于常染色体遗传病．一对夫妇生有一位重型β地中海贫血症患儿，分析发现，患儿β-珠蛋白第39位氨基酸的编码序列发生了突变（C→T）．用PCR扩增包含该位点的一段DNA片段l，突变序列的扩增片段可用一种限制酶酶切为大小不同的两个片段m和s；但正常序列的扩增片段不能被该酶酶切，如甲图．目前患儿母亲再次怀孕，并接受了产前基因诊断．家庭成员及胎儿的PCR扩增产物酶切电泳带型示意图如乙图．（终止密码子为UAA、UAG、UGA．）

（1）上述研究过程所用限制酶主要从中分离纯化出来，其作用的化学键是．PCR扩增DNA片段时利用解开双链．
（2）图示基因突变属于碱基对的，据图分析，胎儿的基因型是（基因用A、a表示）．患儿患病可能的原因是的原始生殖细胞通过减数分裂产生配子时发生了基因突变；从基因表达角度分析，其患病的原因是．
（3）若此家庭中患儿为男性，成年后与一表现型正常女子婚配（父母正常但有一个患地中海贫血症的弟弟）．请预测他们婚后生育一个患此病男孩的概率是．
（4）研究发现，β--珠蛋白基因其它碱基部位的突变还会造成β-珠蛋白再生障碍性贫血，已发现第17对染色体的某基因座上至少有15种基因种类，这说明基因突变具有特点．同时还发现许多中国人的第17个碱基A突变成T的相当普遍，但并未引起β--珠蛋白再生障碍性贫血，其原因是．

人的生长激素是 一种蛋白质，如图是将人的生长激素基因导入细菌B内制造“工程菌”的示意图，所用载体为质粒A．已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B以后，其上的基因能得到表达．请回答下列问题：

 （1）重组质粒通常是在体外完成，必须用到的工具酶为．
（2）目前把重组质粒导入受体细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒，有的导入的是普通质粒A，只有少数导入的是重组质粒．此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了普通质粒A或重组质粒：将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上，能够生长的就是 导入了普通质粒A或重组质粒，反之则没有．使用这种方法鉴别的原因是．
（3）若把通过鉴定证明导入普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养，会发生的现象是．原因是．
（4）导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么？．
（5）基因工程的原理是．

细菌常常作为基因工程的受体细胞，下列理由较充分的是（　　）

如图为某同学绘制的含有两个碱基对的DNA片段（“O“代表磷酸基团），几位同学对此图做出评价，其中正确的是（　　）

2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书．如图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：

（1）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于工程技术范畴．除了上述方法，有些目的基因可以从基因文库中获取．基因文库包含和等类型，其中前者的基因中含有启动子．
（2）图中③过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是类化合物．Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA的特点．
（3）植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是（任举一例）．
（4）对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用、技术．
（5）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造．如图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析：

①人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加．
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的（填相应基因的简写字母），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长．若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为

-CTGCA

-C

，则该酶识别的核苷酸序列是．

某省有大量的盐碱地，科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因，培育出了耐盐水稻新品系．如图是培育过程简图，请回答下面的问题．

（1）阶段Ⅰ的核心步骤是．在构建重组质粒b的过程中，一般需用同种限制酶切割个磷酸二酯键．如果在此过程中形成的是平末端，则起“缝合”作用的DNA连接酶来自．
（2）为保证耐盐基因的正常转录，重组质粒b上耐盐基因的两端应含有．
（3）阶段Ⅱ的核心过程是和，人工配制的培养基中除了必要的营养物质和琼脂外，还必须添加．
（4）在植物组织培养一段时间后，发现不同细胞所含蛋白质种类和数量有明显差异，其原因是．由耐盐水稻细胞培育成了耐盐水稻植株，说明植物细胞具有．
（5）现有两个二倍体水稻品种，其基因型分别为yyRr、Yyrr．科学家进行如下实验：将花粉除去细胞壁后进行原生质体融合，再把这些融合细胞进行组织培养，培育出水稻植株．该过程中，一般用作为化学诱导剂来诱导花粉合．若原生质体之间只考虑两两融合，培育的后代有种基因型．

下列有关四个遗传系谱图的叙述正确的是（　　）