题目内容

2009年10月,我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书.如图表示该抗虫水稻主要培育流程,据图回答:

(1)杀虫基因(crylA)是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构,设计并人工合成的,这属于
 
工程技术范畴.除了上述方法,有些目的基因可以从基因文库中获取.基因文库包含
 
和
 
等类型,其中前者的基因中含有启动子.
(2)图中③过程中,能促进农杆菌移向植物细胞的物质是
 
类化合物.Ti质粒是农杆菌中的一种质粒,其上有T-DNA,把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA
 
的特点.
(3)植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外,还可采取的方法是
 
(任举一例).
(4)对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用
 
、
 
技术.
(5)组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造.如图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(示部分基因及部分限制酶作用位点),据图分析:

①人工改造时,要使抗虫基因表达,在上图所示基因表达载体中还应添加
 
.
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理,其目的之一是除去或破坏质粒上的
 
(填相应基因的简写字母),保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长.若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为
-CTGCA
-C
,则该酶识别的核苷酸序列是
 
.
考点:基因工程的原理及技术
专题:
分析:上图表示的是抗除草剂大豆的形成过程,其中①表示质粒的获取和切割;②是用DNA连接酶连接目的基因和质粒,获得重组质粒;③目的基因导入受体细胞;④表示将受体细胞进行植物组织培养,这一技术利用了植物细胞的全能性,包括2个关键步骤,即利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行脱分化和再分化.
解答: 解:(1)生产出自然界没有的蛋白质属于蛋白质工程.基因文库包含基因组文库和部分基因文库(或cDNA文库)
等类型,其中基因组文库中基因含有启动子.
(2)图中③过程中,酚类化合物能促进农杆菌移向植物细胞.Ti质粒上含有T-DNA,把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用T-DNA可转移至受体细胞 (并且整合到受体细胞染色体的DNA上)的特点.
(3)植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法:农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法.
(4)目的基因是否转录形成信使RNA,一般采用分子杂交法;目的基因是否翻译形成蛋白质,采用抗原-抗体杂交技术检测.
(5)①作为基因工程载体的质粒应该包含:复制原点、限制酶的切割位点、标记基因、启动子和终止子.图中的Ti质粒缺少启动子,所以要使抗虫基因表达,还应插入启动子.
②图中看出,tms基因能够编码生长素,tmr基因能够编码细胞分裂素,这两种激素能够促进植物的生长.因此人工改造时用限制酶Ⅰ处理,其目的之一是除去或破坏质粒上的tmr、tms,保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长;另外只有一个插入位点,也有利于目的基因(或外源DNA)准确插入.若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为,则该酶识别的核苷酸序列是GACGTC.
故答案为:
(1)蛋白质     基因组文库      部分基因文库(或cDNA文库)
(2)酚         可转移至受体细胞 (并且整合到受体细胞染色体的DNA上)
(3)基因枪法、花粉管通道法(答任一种给分)
(4)分子杂交  抗原-抗体杂交
(5)①启动子    ②tmr、tms       CTGCAG(或GACGTC)
点评:本题难度适中,属于考纲中识记、理解层次的要求,着重考查了基因工程的步骤、基因表达载体的组成、蛋白质工程等知识,要求考生具有一定的识图分析能力,解题的关键是明确基因工程的过程.
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