血友病的病因之一是由于基因TPO突变而不能合成凝血因子.目前该病的临床治疗主要有两种基因疗法(如下图所示).图中方法一是将基因工程菌生产的凝血因子注入患者体内;方法二是用含目的基因的重组病毒感染患者,使患者获得病毒直接提供的凝血因子.目前主要选择腺相关病毒(简称AAV)作为治疗用基因载体.AAV是有衣壳、无包膜的DNA小病毒,基因组含有病毒衣壳基因rep和复制相关蛋白基因cap,以及其他基因,但缺乏复制激活基因E,所以,AAV感染细胞后不会复制,对人体安全.当AAV和其他DNA病毒(含有基因E)同时感染人体细胞后,AAV会被激活复制、表达,形成病毒粒子(含DNA和衣壳),病毒粒子具有侵染能力.AAV病毒衣壳不能包装较大DNA分子.

(1)过程①②需要用的工具酶有
 

(2)经过②过程得到的重组AAV中去除了基因rep、cap,缩短了AVV的长度,使得AAV能结合
 
;重组AAV转染细胞产生病毒粒子,需要人工重组辅助质粒,这是因为
 

(3)③过程转染细胞产生的病毒粒子中可能含有的质粒是
 
,因此需要对用于基因治疗的病毒粒子进行检验、提纯.
(4)④过程需要用到
 
等技术.实验发现,用昆虫细胞、酵母菌、人体细胞承担重组质粒与重组AAV的转染,都能收集到凝血因子,这一现象说明
 

(5)⑥过程采用患者细胞作为感染的受体细胞,可以避免
 
反应;相对于⑤治疗方法,⑥治疗方法的优点是:
 
 0  100845  100853  100859  100863  100869  100871  100875  100881  100883  100889  100895  100899  100901  100905  100911  100913  100919  100923  100925  100929  100931  100935  100937  100939  100940  100941  100943  100944  100945  100947  100949  100953  100955  100959  100961  100965  100971  100973  100979  100983  100985  100989  100995  101001  101003  101009  101013  101015  101021  101025  101031  101039  170175 

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