题目内容
11．柴油是重要的燃料油之一，也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染．科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g，加入含100mL培养基M的锥形瓶中，在30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤连续培养5次，分离获得醋酸钙不动杆菌DB（一种柴油降解菌）．利用该菌，科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件，获得实验结果如图．请回答下列问题：
（1）为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以柴油为唯一碳源，还要考虑无机盐的种类和比例．
（2）在实验过程中，科研人员“30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或“使柴油分解菌富集”）．
（3）在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用平板划线法（填接种方法）在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行灼烧灭菌处理．培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的菌落进行重复培养，直到分离出单一菌株．
（4）据图分析，若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg•kg-1左右，并添加浓度为6mg．g-1的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果．
分析 分析图1：随着柴油添加量的增加，柴油的降解率呈先增加后下降的趋势，即在4000mg．kg-1左右柴油的降解率最高．
分析图2：随着表面活性剂的浓度的上升，柴油的降解率呈不断增加的趋势，图中表面活性剂的浓度为6mg．g-1左右时降解率最高．
解答 解：（1）分析题意可知，醋酸钙不动杆菌DB是一种柴油降解菌，因此为获得醋酸钙不动杆菌DB，培养基M应以柴油为唯一碳源，还要考虑无机盐的种类和比例．
（2）在实验过程中，科研人员“30℃条件下震荡培养5天，取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基，按此步骤，连续培养5次”的主要目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或使柴油分解菌富集）．
（3）在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时，在严格无菌条件下，采用平板划线法或稀释涂布平板法在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种，接种完，对接种环进行灼烧灭菌处理．培养一段时间后，观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的菌落进行重复培养，直到分离出单一菌株．
（4）根据柱形图结果可知，在柴油添加量为4000mg．kg-1左右柴油的降解率最高，表面活性剂的浓度为6mg．g-1时降解率最高，因此若某地区土壤发生柴油重度污染时，则可以将对被柴油重度污染的土壤进行稀释，使柴油浓度降低至4000mg．kg-1左右，并添加浓度为6mg．g-1的表面活性剂，以有利于提高对柴油的降解效果．
故答案为：
（1）柴油 种类
（2）使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加（或“使柴油分解菌富集”）
（3）平板划线法 灼烧 菌落
（4）6mg．g-1
点评 本题考查了微生物分离和纯化的有关知识，要求考生掌握选择培养基在分离微生物的实验过程中的运用，识记纯化微生物的接种方法，能够根据柱形图中的信息提出有效的降解柴油污染的措施．
名校课堂系列答案| A． | 细胞的增殖与分化 | B． | ATP的合成与分解 | ||
| C． | 基因突变 | D． | 基因重组 |
| A． | 该酶的最适催化温度为30℃左右 | |
| B． | 图2和图4能说明该酶一定不是胃蛋白酶 | |
| C． | 由图4实验结果可知酶具有高效性 | |
| D． | 由实验结果可知酶具有专一性 |
测定生物组织中ATP的含量，常常利用“荧光素-荧光素酶生物发光法”．该方法的主要步骤如下：①将所测生物组织研磨后沸水浴10分钟，然后冷却至室温；②离心处理后取一定量的上清液放人分光光度计（测定发光强度的仪器）反应室内，并加人适量的荧光素和荧光素酶，在适宜条件下进行反应，③记录发光强度并计算ATp含量．分析上述实验步骤并回答问题：