题目内容

6.家蚕细胞具有高效表达外源基因能力.将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药.
(1)进行转基因操作前,需用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞.
(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和终止子之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,采用的技术有分子杂交技术和抗原-抗体杂交技术.
(3)培养家蚕细胞时,细胞会产生贴壁生长和增大细胞贴壁生长的附着面积现象.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以接触抑制,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.

分析 基因工程的基本操作步骤主要包括四步:①目的基因的获取;②基因表达载体的构建;③将目的基因导入受体细胞;④目的基因的检测与表达.从分子水平上检测目的基因的方法:(1)分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.

解答 解:(1)为了使组织分散开为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶.
(2)基因表达载体包括启动子、终止子、目的基因和标记基因.启动子位于目的基因的首端,终止子位于目的基因的尾端.若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,采用的技术有DNA-RNA分子杂交技术检测是否转录形成RNA和用抗原-抗体杂交技术检测是否有表达产物产生.
(3)利用生物反应器培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制.通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积增加培养的细胞数量,也有利于空气交换.
故答案为:
(1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)
(2)启动子   终止子     分子杂交技术      抗原-抗体杂交技术
(3)接触抑制    增大细胞贴壁生长的附着面积

点评 本题考查基因工程、细胞工程等相关知识,着重识记动物细胞培养和PCR技术的有关内容,意在考查考生的识记能力和应用能力,属于容易题.

练习册系列答案
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17.黄瓜是日光温室中栽培最普遍的蔬菜.为提高黄瓜产量,科研人员研究了春季和冬季日变化对温室栽培黄瓜叶片光合速率的影响(如图),同时对两个黄瓜品种的光合产物输出率进行了研究,实验中使用14C标记的C02对黄瓜叶片饲喂48小时后,经测定并计算得到相关数值(如表).
季节品种14C光合产物的出率(%)14C光合产物在植株各部分的配置
瓜(%)茎(%)根(%)
冬季长春密刺22.272.3410.66        2.53
农大14号35.273.9819.80        5.11
春季长春密刺51.9936.958.78         2.08
农大14号47.1723.0313.68        3.71
(1)图中测定的黄瓜叶片光合速率的含义是单位时间、单位面积的叶片吸收CO2的量.
(2)冬季日光温室黄瓜叶片光合谏率明思低干春季,其主要原因是冬季光照强度和温度较春季的要低.由表中结果可进一步推断,冬季日光温室黄瓜叶片光合速率低的原因还可能是在冬季栽培条件下其光合产物输出率低,光合作用的产物在叶片中积累,抑制了光合作用.
(3)在光合产物输出率实验中采用的研究方法是同位素示踪法.由表可知,冬季影响黄瓜产量的原因除与(1)中涉及因素有关外,还与光合作用的产物在植株各部分分配有关.
(4)表中适合冬季栽培的品种为农大14号.原因是在冬季栽培条件下其光合产物输出率高于长春密刺,而且向茎中的分配比例高,形成了适于冬季栽培的株形,有利于光合作用中光反应的过程.
11.柴油是重要的燃料油之一,也因泄露与不当排放等造成了严重的环境污染.科研人员从遭受柴油污染的土壤样品中取土样5g,加入含100mL培养基M的锥形瓶中,在30℃条件下震荡培养5天,取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基,按此步骤连续培养5次,分离获得醋酸钙不动杆菌DB(一种柴油降解菌).利用该菌,科研人员进一步探索其降解柴油的最佳条件,获得实验结果如图.请回答下列问题:

(1)为获得醋酸钙不动杆菌DB,培养基M应以柴油为唯一碳源,还要考虑无机盐的种类和比例.
(2)在实验过程中,科研人员“30℃条件下震荡培养5天,取出5mL培养液接种到相同的新鲜培养基,按此步骤,连续培养5次”的主要目的是使醋酸钙不动杆菌DB的数量增加(或“使柴油分解菌富集”).
(3)在分离醋酸钙不动杆菌DB操作时,在严格无菌条件下,采用平板划线法(填接种方法)在制备好的牛肉膏蛋白胨培养基上进行接种,接种完,对接种环进行灼烧灭菌处理.培养一段时间后,观察、挑取平板上形态、颜色、大小和隆起度等一致的菌落进行重复培养,直到分离出单一菌株.
(4)据图分析,若某地区土壤发生柴油重度污染时,则可以将对被柴油重度污染的土壤进行稀释,使柴油浓度降低至4000mg•kg-1左右,并添加浓度为6mg.g-1的表面活性剂,以有利于提高对柴油的降解效果.

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