题目内容
[生物--生物技术实践]
柠檬果实富含维生素C和柠檬酸，果皮油细胞中有具特殊香味的柠檬油，在食品、保健、美容等领域应用广泛．目前发现可通过酵母菌发酵生产柠檬酸．请回答下列问题：
（1）若想从自然界中分离获取酵母菌，需使用 培养基，实验中对培养皿进行灭菌常用 法．
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是 ，接种后需将培养皿倒置并放在 中培养．
（3）柠檬油是某些化妆品的优质配料，提取柠檬油常用的方法是 ．为了使柠檬油易与水分离，需加入 ，并调节pH到7～8．
（4）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是 和 ．
柠檬果实富含维生素C和柠檬酸，果皮油细胞中有具特殊香味的柠檬油，在食品、保健、美容等领域应用广泛．目前发现可通过酵母菌发酵生产柠檬酸．请回答下列问题：
（1）若想从自然界中分离获取酵母菌，需使用
（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是
（3）柠檬油是某些化妆品的优质配料，提取柠檬油常用的方法是
（4）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是
考点：微生物的分离和培养,提取芳香油
专题：
分析：（1）培养基的分类
①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．
②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．
③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
（2）无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵． a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
（3）微生物培养的程序
a．器具的灭菌、b．培养基的配制、c．培养基的灭菌、d．倒平板、e．微生物接种、f．恒温箱中培养
g．菌种的保存
（4）植物芳香油的提取方法
（5）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是材料的选择和培养基的组成：
①材料的选择表现在：不同植物的诱导成功率很不相同；就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响；花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株．选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素．
②培养基也影响花粉植株的培养：花药培养对培养基配方的要求更为严格．花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基．
①按物理性质分，分为液体培养基和固体培养基，固体培养基中含有凝固剂，一般是琼脂．
②按化学成分分，分为天然培养基和合成培养．两者的区别是天然培养基成分不确定，合成培养基成分的含量是确定的．
③按用途分，分为选择培养基和鉴别培养基．选择培养基主要是培养、分离特定的微生物，培养酵母菌可在培养基中加入青霉素；鉴别培养基可以鉴定不同的微生物，比如鉴别饮用水中是否含有大肠杆菌，可以用伊红-美蓝培养基，如果菌落呈深紫色，并带有金属光泽，说明有大肠杆菌．
（2）无菌操作：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵． a．实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒；
b．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；
c．为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
d．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．
（3）微生物培养的程序
a．器具的灭菌、b．培养基的配制、c．培养基的灭菌、d．倒平板、e．微生物接种、f．恒温箱中培养
g．菌种的保存
（4）植物芳香油的提取方法
（5）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是材料的选择和培养基的组成：
①材料的选择表现在：不同植物的诱导成功率很不相同；就同一植物来说，亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响；花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株．选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素．
②培养基也影响花粉植株的培养：花药培养对培养基配方的要求更为严格．花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基．
解答：
解：（1）自然界中的菌种很多，如果要进行选择，需要使用选择培养基；培养基时液态的，在进行灭菌时应该使用高压蒸汽灭菌．
（2）微生物的培养过程需要遵循无菌操作，防止其他杂菌的污染；由于每一种微生物的生长都有最适温度，所以培养时应该在恒温箱中进行培养．
（3）由于柠檬油在水中加热时易焦糊，不适用于水蒸气蒸馏法，所以常采用压榨法进行提取；出去柠檬油中的水分需要加入的试剂是 NaHCO3和Na2SO4．
（4）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是材料的选择和培养基的组成．
答案：（1）选择 高压蒸汽灭菌
（2）防止杂菌污染 恒温箱
（3）压榨法 NaHCO3和Na2SO4
（4）材料的选择 培养基的组成
（2）微生物的培养过程需要遵循无菌操作，防止其他杂菌的污染；由于每一种微生物的生长都有最适温度，所以培养时应该在恒温箱中进行培养．
（3）由于柠檬油在水中加热时易焦糊，不适用于水蒸气蒸馏法，所以常采用压榨法进行提取；出去柠檬油中的水分需要加入的试剂是 NaHCO3和Na2SO4．
（4）利用柠檬花粉进行组织培养时，诱导花粉植株能否成功的主要影响因素是材料的选择和培养基的组成．
答案：（1）选择 高压蒸汽灭菌
（2）防止杂菌污染 恒温箱
（3）压榨法 NaHCO3和Na2SO4
（4）材料的选择 培养基的组成
点评：本题是一道综合题目，知识点设计微生物的培养、花药离体培养植物有效成分的提取，解答本题的关键是相关的知识点要熟练掌握，比如微生物培养基的分类、无菌操作、影响植物组织培养的因素和植物有效成分提取的方法等．
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