题目内容
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：
注：图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来 ，因为由两种不同限制酶切割后形成的黏性末端 。
（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多的方法是 。如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是 。
（3）可以利用基因工程的方法对猪的器官进行改造，将器官供体基因组导入 ,以抑制 ，或设法除去 ，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。
（4）以下有关绿色荧光蛋白转基因克隆猪的叙述正确的是
| A．该转基因克隆猪的绝大部分性状同受体母猪 |
| B．绿色荧光蛋白转基因克隆猪一定是雌性的 |
| C．受体母猪对移入的早期胚胎一般不会发生免疫排斥反应 |
| D．绿色荧光蛋白基因常取自水母的基因组文库 |
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）
④表达出蓝色荧光蛋白。
（1）可以连接（2分） 相同（或互补）（2分）
（2）显微注射技术（2分） 为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因（2分）
（3）某种调节因子 抗原决定基因的表达 抗原决定基因
（4）C（2分）
（5）②①③④（2分）
解析试题分析：
（1）限制酶 Ⅰ和Ⅱ切割后产生的黏性末端相同,即均产生GATC 序列, 因此可以用DNA 连接酶连接起来。
（2）目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射技术。GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，可用于鉴定受体细胞中是否含有目的基因。
（3）将器官供体基因组导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，对猪的器官进行改造，可培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。
（4）转基因克隆猪的绝大部分性状同提供细胞核的个体相同，A错误；绿色荧光蛋白转基因克隆猪的性别也同提供细胞核的个体相同，B错误；胚胎移植之所以成功，原因之一是受体母猪对移入的早期胚胎一般不会发生免疫排斥反应，C正确；绿色荧光蛋白基因常取自水母的cDNA文库，D错误。
（5）蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计，推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列，蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成），表达出蓝色荧光蛋白。
考点：本题考查基因工程与细胞工程、蛋白质工程的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容。能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论的能力。
