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常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵,而自然界中某些酵母菌能分解木糖产生酒精,但是对酒精的耐受能力差。科学家利用基因工程培育了能利用这两种糖进行发酵且对酒精耐受能力强的酿酒酵母。

(1)酿酒酵母代谢类型是 无氧呼吸的反应式为

(2)将自然界中采集到的葡萄带回实验室,用无菌水将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中,然后将瓶中的液体用 法接种于固体培养基上,在适宜的条件下培养,获得各种菌落。在葡萄酒酿造过程中,葡萄也需要冲洗,其主要目的是 。

(3)将培养基上的酵母菌菌株转接到 的培养基中,无氧条件下培养一周后,有些酵母菌死亡,说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。从存活的酵母菌中提取DNA,经PCR技术获得目的基因,PCR技术获得同一种目的基因的原理是 。

(4)将目的基因连接到质粒上,该质粒具有尿嘧啶合成酶基因作为标记基因。将重组质粒导入酵母菌时,应选择缺乏 能力的酿酒酵母作为受体菌。

(5)将上述获得的转基因酿酒酵母接种在以葡萄糖和木糖为碳源的培养基中进行发酵能力测试。随着发酵的持续进行,若该酿酒酵母能够存活,说明它能 ,即说明所需菌株培育成功。

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