题目内容
【题目】绞股蓝叶片细胞中含有抗TMV(烟草花叶病毒)基因，对TMV具有抗感染能力，烟草是双子叶植物，由于TMV的感染会导致大幅度减产，研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示：
（1）图中①过程表示______________，通过这种方法构建的文库属于______________文库。
（2）在过程③构建重组Ti质粒时，必须在目的基因的两侧添加______________和______________，应该含有的标记基因是______________基因。
（3）④过程常用的方法是______________。
（4）通过⑤获得再生植株的理论基础是______________，过程⑥可采取______________的方法，检测植株是否合成了抗TMV蛋白。
【答案】逆转录 cDNA（ 部分基因） 启动子 终止子 抗卡那霉素 农杆菌转化法 植物细胞的全能性 抗原一抗体杂交
【解析】
图中①表示以绞股蓝叶片细胞中的RNA为模板，逆转录形成cDNA文库的过程，②表示从cDNA文库中获取目的基因，③代表基因表达载体的构建，④表示把基因表达载体导入受体细胞，⑤目的基因的检测与鉴定。
（1）根据分析可知，图中①过程表示逆转录，通过这种方法构建的文库属于cDNA（部分基因）文库。
（2）在基因表达载体中，目的基因的两侧应含有启动子和终止子，以保证目的基因正常转录。根据⑤过程中培养基中含有卡那霉素，可判断基因表达载体中抗卡那霉素基因为标记基因。
（3）将基因表达载体导入双子叶植物，常选用农杆菌转化法。
（4）植物细胞具有全能性，因此可通过⑤获得再生植株，检测植株是否合成了抗TMV蛋白，可采取抗原一抗体杂交的方法。
类型 | 步骤 | 检测内容 | 方法 | 结果显示 |
分 子 检 测 | 导入 检测 | 目的基因是否插入受体细胞染色体的DNA上 | DNA分子杂交技术(DNA和DNA之间) | 是否成功显示出杂交带 |
表 达 检 测 | 目的基因是否转录出mRNA | 核酸分子杂交技术( DNA和mRNA之间) | 同上 | |
目的基因是否翻译出蛋白质 | 蛋白质分子杂交(抗原和抗体之间) | 同上 | ||
个体生物学水平的鉴定 | ①确定是否具有抗性及抗性程度 ②基因工程产品与天然产品的活性是否相同 | ①抗虫或抗病的接种实验 ②基因工程产品与天然产品活性的比较 | 是否赋予了预期抗性或蛋白质活性 | |
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