Question

如图为单克隆抗体制备流程示意图．

（1）

 

技术是单克隆抗体技术的基础．
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是

 

．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的

 

，以保证生命活动的正常进行．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是

 

．
（4）选出的杂交瘤细胞具备

 

特点．
（5）淋巴细胞是由动物体

 

中的

 

细胞分化、发育而．
（6）图2表示从正常人和患者体内获取的P⁵³基因的部分区域．与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分区域（见图2），那么正常人的会被切成

 

个片段，而患者的则被切割成长度为

 

对碱基的两种片段．如果某人的P⁵³基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是

 

（以P⁺表示正常基因，Pⁿ表示异常基因）

Answer 1

考点：单克隆抗体的制备过程,基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图1，将特定的抗原注射小鼠，筛选出产生抗体的淋巴细胞；与骨髓瘤细胞融合，转移到HAT培养基中培养，未融合的细胞死亡，而杂交瘤细胞存活；杂交瘤细胞分开培养，选育出产生高特异性抗体的细胞．
分析图2，根据图示及限制酶E识别序列为CCGG可知，因为正常人的该基因上有限制酶E和限制酶B的切割位点，正常人的会被切成3个片段；患者的限制酶E的酶切位点消失，只有限制酶B的酶切位点，所以该基因被切除两段，长度为则被切割成长度为：290+170=460和220．

解答： 解：（1）单克隆抗体制备技术是动物细胞融合技术的应用之一，其基础是动物细胞培养．
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的种类和浓度，关注培养基的渗透压和营养充沛，以保证生命活动的正常进行．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．
（4）杂交瘤细胞具备骨髓瘤细胞在体外能大量增殖的特点，又具备B淋巴细胞能分泌特异性抗体的特点．
（5）淋巴细胞是骨髓中的造血干细胞分化、发育而来．
（6）由图示及限制酶E识别序列为CCGG可知，正常人的会被切成3个片段，因为正常人的该基因上有限制酶E和限制酶B的切割位点，患者的限制酶E的酶切位点消失，只有限制酶B的酶切位点，所以该基因被切除两段，长度为则被切割成长度为：290+170=460和220．如果某人的P⁵³基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，可知该人体内的一对基因中一个是正常的，一个是突变的（异常基因），因此该人的基因型是P⁺Pⁿ．
故答案为：
（1）动物细胞培养
（2）筛选杂交瘤细胞   种类和数量（浓度）
（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（4）在体外大量增殖和分泌特异性抗体
（5）骨髓     造血干
（6）3      460、220      P⁺Pⁿ

点评：本题以图形为载体，考查单克隆抗体的制备过程和基因工程知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断．