T-DNA可随机插入植物基因组内.导致被插入基因发生突变．用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下:种植野生型拟南芥.待植株形成花蕾时.将地上部分浸入农杆菌(其中的T-DNA上带有抗除草剂基因)悬浮液中以实现转化．在适宜条件下培养.收获种子(称为T1代)．(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾.需要去除 .因为后者产生的会抑制侧芽的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变．用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化．在适宜条件下培养，收获种子（称为T₁代）．
（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除

，因为后者产生的

会抑制侧芽的生长．
（2）为筛选出已转化的个体，需将T₁代播种在含

的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T₂代）．
（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₂代播种在含

的培养基上，获得所需个体．
（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体．为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与

植株进行杂交，再自交

代后统计性状分离比．
（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性

．
（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段．其过程是：提取

植株的DNA，用限制酶处理后，再用

将获得的DNA片段连接成环（如图），以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取

作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息．

考点：基因工程的应用,植物激素及其植物生长调节剂的应用价值

专题：

分析：顶端优势是指顶芽优先生长，而侧芽受到抑制的现象．
因为要扩增的是被插入基因片段，所以应提取突变体植株的DNA．将DNA片段连接起来的酶是DNA连接酶．图示中表示出了DNA合成方向是：引物A是顺时针方向，那么，B、D就是逆时针方向，C也是顺时针方向．利用A、D这对引物扩增的将是T-DNA片段，而利用B、C这对引物扩增的才是被插入的基因片段．

解答： 解：（1）顶芽的存在可导致顶端优势，进而影响侧枝上花蕾的形成．
（2）野生型拟南芥是否被农杆菌转化，可在个体水平进行检测，看它是否具有抗除草剂性状．因此可将其种植在含除草剂的培养基中．
（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T₁代播种在含盐的培养基上，获得所需个体．经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体．
（4）单基因突变引起的变异，其遗传符合基因分离定律，就可用变异株与野生型植株杂交，而后自交，统计自交后代性状分离比进行判断．如果出现3：1的分离比，则为单基因突变．
（5）由（3）中“抗盐性状的突变体”信息知：野生型基因的存在导致植物的抗盐性降低．
（6）T-DNA存在于诱导形成的拟南芥突变体植株的DNA中．DNA连接酶可将不同的DNA片段进行连接．因为DNA两条链反向平行，由图示环状DNA外侧链DNA合成方向可判断，DNA扩增过程所选的引物应为B、C，这样可确保被插入的基因片段得到复制．要注意DNA两条单链反向平行，B、C作为引物可保证插入的基因片段优先复制．
故答案为：
（1）顶芽    生长素
（2）（一定浓度的）除草剂
（3）（一定浓度的）盐
（4）野生型    1
（5）降低
（6）突变体    DNA连接酶    B、C

点评：本题以转基因拟南芥的培养过程为信息载体，考查了基因工程和遗传定律的相关知识，意在考查考生的识图能力和理解能力，具有一定的难度．

练习册系列答案

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②	1	2
③	2	5
④	3	13
⑤	3	11