Question

化学降解法是一种传统的测定DNA分子碱基序列的方法，具体操作过程如下图：

(1)由待测序的DNA片段获得DNA单链的方法是       ，图中特定化学试剂的作用是破坏DNA单链在某种特定碱基处的      键。
(2)电泳时，电泳槽内先要加入             ，再将处理好的不同长度的DNA片段样品加入点样孔，利用待分离样品中各分子的带电性质，以及分子__         __、形状的不同，使它们在电场作用下产生不同的        ，从而实现样品中各分子的分离和鉴定。
(3)从理论上分析，要想测出图中该DNA片段的全部碱基序列，按以上模式操作至少        次。
(4)若想进一步判定该DNA片段中是否含有某基因，可用基因探针检测。探针的制备是取某基因的        条链，并作            。

Answer 1

⑴用解旋酶（或95℃高温）处理待测DNA片段    磷酸二酯⑵缓冲液      （本身）大小    迁移速度  ⑶3 ⑷一    放射性同位素标记

解析试题分析：（1）用DNA解旋酶或高温处理能将DNA解旋获得DNA单链。图中特定化学试剂的作用是切割DNA单链，获得DNA判断，是作用于DNA骨架的磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键。
（2）电泳时，电泳槽内先要加入缓冲液。利用待分离样品中各分子的带电性质，以及分子（本身）大小、形状的不同，使它们在电场作用下产生不同的迁移速度，实现样品中各分子的分离和鉴定。
（3）按照图示方式1次可以测定1种碱基排序，3次可以测定3种碱基排序，前面3种碱基排序确定，第4种碱基排序也随之确定，故至少需要操作3次。
（4）基因探针是取某基因的1条链，用放射性同位素标记或荧光标记。
考点：本题考查化学降解法相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构能力。