题目内容

19.人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得.流程如下:

(1)htPA基因与载体构建重组表达载体.检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用DNA分子杂交(或核酸探针)技术.
(2)为获取更多的卵(母)细胞,要对供体母羊注射促性腺激素,使其超数排卵.采集的精子需要经过获能(处理),才具备受精能力.
(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是显微注射法.为了获得母羊,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定,一般采用SRY-PCR方法,选择出现阴性反应的(填“阳性”、“阴性”)胚胎进行移植.利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的全能性.
(4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到htPA(或人组织纤溶酶原激活物),说明目的基因成功表达.

分析 DNA重组技术至少需要三种工具:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体.
目的基因分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.

解答 解:(1)检测目的基因是否已插入受体细胞DNA,可采用DNA分子杂交(或核酸探针)技术,原理是碱基互补配对.
(2)对供体母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵.采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力.
(3)将目的基因导入受精卵的方法是显微注射法,为获得母羊,所以胚胎移植前需要进行性别鉴定,利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体,这体现了早期胚胎细胞的全能性.
(4)基因表达成功时可获得目的基因的产物,既在转htPA基因母羊的羊乳中检测到htPA(或人组织纤溶酶原激活物),说明目的基因成功表达.
故答案为:
(1)DNA分子杂交(或核酸探针)
(2)超数排卵;   获能(处理)
(3)显微注射法     性别鉴定      阴性     全能性
(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)

点评 本题结合转htPA基因母羊的培育过程图,考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤,掌握各步骤中的相关细节,能结合所学的知识准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.

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