Question

9．人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原．疫苗生产和抗体制备的流程如图：

（1）过程①代表的是逆转录．②过程可以通过PCR技术大量扩增A基因，该技术的原理是DNA双链复制．
（2）过程③构建A基因重组载体时，必须使用限制酶和DNA连接酶两种工具酶．
（3）若受体细胞为动物细胞，过程④常用的方法是显微注射法（技术）．
（4）动物细胞融合过程中，区别于植物细胞常用的诱导方法是用灭活的病毒诱导．
（5）在将X进行扩大培养之前，至少需要经过两次筛选，方法分别是用选择性培养基筛选和用专一抗体检测．
（6）以上实验操作过程中用到的技术除了PCR技术还有转基因技术（基因工程）、动物细胞融合技术、动物细胞培养技术（至少写三个）．
（7）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白来制备疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的抗A蛋白的单克隆抗体与分离出的病毒进行特异性检测．

Answer 1

分析 分析题图：图示为疫苗生产和抗体制备的流程之一，其中①表示逆转录过程；②是获取目的基因（A基因）的过程；③是基因表达载体的构建过程；④是将目的基因导入受体细胞的过程；⑤是从小鼠皮下获取已经免疫的B细胞的过程；⑥表示B细胞的增殖和分化过程；⑦是细胞融合过程；X为杂交瘤细胞；⑧表示克隆化培养和获取单克隆抗体．

解答 解：（1）由以上分可知①是逆转录．PCR技术可在体外大量扩增目的基因，其原理是DNA复制．
（2）构建基因表达载体时，必须使用限制酶和DNA连接酶两种工具酶，即首先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和运载体，其次用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（3）将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法．
（4）诱导植物原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇），诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）、化学法（聚乙二醇）和生物法（灭活的病毒）．因此，动物细胞融合过程中，区别于植物细胞常用的诱导方法是用灭活的病毒诱导．
（5）在单克隆抗体的制备过程中，至少需要经过两次筛选，一次是用用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；另一次是用专一抗体检测方法筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．
（6）以上实验操作过程中用到的技术除了PCR技术还有转基因技术（基因工程）、动物细胞融合技术、动物细胞培养技术．
（7）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的A蛋白所制备的疫苗．对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用抗原-抗体杂交法，即用图中的抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测．
故答案为：
（1）逆转录                 PCR                DNA双链复制
（2）DNA连接酶      
（3）显微注射法（技术）        
（4）用灭活的病毒诱导
（5）选择性培养基       专一抗体
（6）转基因技术（基因工程）、动物细胞融合技术、动物细胞培养技术
（7）A蛋白           抗A蛋白的单克隆抗体

点评 本题结合疫苗生产和抗体制备的流程图，考查基因工程、动物细胞融合技术、单克隆抗体等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，识记单克隆抗体的制备过程，能准确判断图中各过程的名称．