题目内容
白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将白细胞介素的基因导入到酵母细胞中,使其分泌出有活性的人白细胞介素。
(1)目的基因获取和扩增:
①从健康人体外周静脉血分离得到淋巴细胞,于37℃培养48h,提取细胞总RNA,经 作用生成cDNA。
②根据已知目的基因的核苷酸序列,合成引物、通过PCR扩增获取目的基因,此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是 (至少写出两种)。
(2)重组载体的构建:由图中可知:酶切载体和目的基因用的是___________酶,经DNA连接酶处理,形成重组载体。重组载体的化学本质是 ![]()
(3)将重组载体导入酵母细胞,在培养液中培养一段时间后,利用纯化的产物进行细胞培养实验,可研究人的白细胞介素对于 的作用。
(1)反转录 模板cDNA 热稳定DNA聚合酶 引物
(2)两种限制酶EcoRⅠ与EcoR52 DNA
(3)促进淋巴细胞增殖(抑制肿瘤细胞增殖)
解析试题分析:(1)以RNA为模板合成DNA需要题干逆转录(反转录)。PCR扩增获取目的基因时需要模板cDNA、热稳定DNA聚合酶、引物、原料。(2)由图示可知载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的识别位点和切割位点,所以酶切载体和目的基因用的是两种限制酶EcoRⅠ与EcoR52,重组载体实际上是重组DNA,因而其化学本质是DNA。(3)白细胞介素可治疗癌症,因此可推知白细胞介素可抑制肿瘤细胞的增殖。
考点:本题考查基因工程及基因工程的应用,意在考查识图能力、推理分析能力及识记能力。
(7分)实验是生命科学十分重要的发现和论证方法,实验方法的正确与否,直接影响到实验的结果和结论。请根据题意回答有关实验问题。
(1)在“观察植物细胞有丝分裂”实验中,甲、乙、丙三位同学取洋葱根尖后进行了如下操作。(表中“+”表示该步骤正常操作,“—”表示该步骤未操作)
| 学生 | 步 骤 | ||||
| 解离 | 漂洗 | 染色 | 压片 | 镜检 | |
| 甲 | + | — | + | + | + |
| 乙 | — | + | + | + | + |
| 丙 | + | + | + | + | + |
(2)下图为人工培养的肝细胞中DNA含量随时间变化的曲线,由图分析该细胞的一个细胞周期为 小时,请根据此图在答题纸上绘出在一个细胞周期中每条染色体上的DNA分子随时间的关系坐标图。
(3)用新鲜的菠菜为材料提取叶绿体的色素,但得到的色素滤液的颜色较浅。可能的原因有(写两条) 。