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1.马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻、玉米的第四大粮食作物,目前广泛种植于世界各地.由马铃薯Y病毒(PVY)等引起的病毒性退化导致世界马铃薯产量每年至少减产20%.研究表明,表达病毒外壳蛋白基因( PVY-CP)的转基因马铃薯能显著延缓病害症状的发展和危害程度.目前,该转基因抗病毒马铃薯已经在云南试种成功.请回答下列问题:
(1)PVY-CP在基因工程中称为目的基因.在基因表达载体中,除了要有PVY-CP外,还必须有启动子、终止子和标记基因.将PVY-CP导入马铃薯细胞采用最多的方法是农杆菌转化法.
(2)取40株扩繁后的转基因马铃薯作为实验组,另取40株非转基因马铃薯作为对照组,种植于相同且适宜的条件下,接种PVY病毒,观察发病情况,以确定转基因马铃薯是否具有抗性以及抗性的程度.
(3)成功获得抗PVY马铃薯后,可采用植物细胞工程进行大批量繁育,其理论依据是植物细胞全能性;一些分化的马铃薯细胞,经过激素的诱导,可以脱分化形成具有分生能力的薄壁细胞,进而形成愈化组织,再进一步培养成植株.

分析 (1)基因工程的三个工具:限制酶、DNA连接酶、运载体.
(2)四个步骤:
①目的基因的获取:常用的方法有从基因文库中获取、逆转录法、PCR技术扩增、化学合成法等.
②基因表达载体的构建:常用同种限制酶切割运载体和目的基因之后,用DNA连接酶连接.
③将目的基因导入受体细胞:植物细胞常用的有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法;动物常用显微注射法;微生物常用钙离子处理法.
④目的基因的检测与表达:分子水平的检测有DNA分子杂交技术检测目的基因存在、分子杂交技术检测是否转录、抗原抗体杂交技术检测基因是否表达,还有个体水平的检测等.

解答 解:(1)PVY-CP在基因工程为目的基因;基因表达载体的组成包括PVY-CP(目的基因)、启动子、终止子和标记基因.将PVY-CP导入马铃薯细胞(植物)常用农杆菌转化法.
(2)根据实验的对照性原则和单一变量原则,取40株扩繁后的转基因马铃薯作为实验组,则再取40株非转基因马铃薯作为对照组,种植于相同且适宜的条件下,接种PVY病毒,观察发病情况,以确定转基因马铃薯是否具有抗性以及抗性的程度.
(3)成功获得抗PVY马铃薯后,可采用植物细胞工程中的植物组织培养技术进行大批量繁育,其原理是植物细胞的全能性;高度分化的植物细胞经过激素的诱导,可以脱分化形成具有分生能力的薄壁细胞,进而形成愈伤组织,再分化形成胚状体,再进一步培养成植株.
故答案为:
(1)目的基因  标记基因   农杆菌转化法
(2)非转基因马铃薯   PVY病毒
(3)植物细胞全能性  脱分化  愈化组织

点评 本题主要考查与基因工程相关的知识,要求考生能够识记基因工程的操作程序,掌握基因组文库和部分基因文库的区别;识记目的基因的检测与表达的方法等,再根据所学知识进行相关判断.

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