题目内容
【题目】农作物秸秆中的纤维素阻碍了堆肥技术固体废物领域的发展。为提高堆肥品质，科研人员探究了温度对纤维素分解菌分解能力的影响，实验步骤如下：①纤维素分解菌的筛选、分离及纯化→②纤维素分解菌菌株数量测定→③纤维素酶活力测定和降解滤纸能力的检测。请回答下列问题：
（1）步骤①中，若用稀释涂布平扳法接种，则必须将菌液进行一系列的____________。
（2）步骤②中，在条件适宜的环境下培养细菌10d后，用____________（填—种实验用具）在显微镜下可计算细菌数量。此方法中的“条件”至少包括：适宜温度、以____________作为唯一碳源的____________（填“固态”、“半固态”或“液态”）培养基等，可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡，原理是____________。
（3）步骤③中，酶活力可用培养基上菌落直径及____________来表示。
【答案】梯度稀释 血细胞计数板 纤维素 液态 活细菌的细胞膜具有选择透过性，不会被台盼蓝染色 菌落周围透明圈大小
【解析】
①液体培养基是扩大培养的常用手段。利用稀释涂布平板法接种微生物，经过培养可获得单菌落，便于计数。稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。②筛选纤维素分解菌需使用以纤维素作为唯一碳源的选择培养基，可用刚果红染色法进行筛选，其原理是：刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应；当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红-纤维素复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。③活细胞的细胞膜对物质进出细胞具有选择透过性，可以阻止活细胞不需要的台盼蓝染色剂进入，因此活细胞不能被台盼蓝染成蓝色；当细胞死亡后，细胞膜的选择透过性丧失，台盼蓝染色剂才能进入细胞。
(1) 步骤①中，若用稀释涂布平扳法接种，则必须将菌液进行一系列的梯度稀释。
(2)对于细菌的计数，可用血细胞计数板在显微镜下计算细菌数量。液态培养基有利于获得大量菌体，对纤维素分解菌的菌株数量进行测定，需要提供有利于纤维素分解菌生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长，所以其培养条件包括：适宜温度、以纤维素作为唯一碳源的液态培养基等。由于活细菌的细胞膜具有选择透过性，不会被台盼蓝染色，因此可用台盼蓝染液鉴定视野中细菌是否死亡。
(3) 纤维素分解菌产生的纤维素酶可将培养基中的纤维素分解，导致菌落的周围出现透明圈，而且透明圈越大，说明纤维素分解菌产生的纤维素酶的活性越强，对纤维素的分解和利用越快，细菌繁殖的越多。可见，步骤③中，酶活力可用培养基上菌落直径及菌落周围透明圈的大小来表示。
【题目】蔗糖酶能够催化蔗糖水解。下表是在某一相同温度下研究蔗糖酶和蔗糖浓度对水解反应速率影响的系列实验结果。下列有关该实验说法不正确的是：
实验组 | 实验一 | 实验二 | ||||||||
编号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 |
蔗糖酶浓度 | 0% | 1% | 2% | 4% | 5% | 2% | 2% | 2% | 2% | 2% |
蔗糖浓度 | 10% | 10% | 10% | 10% | 10% | 0% | 5% | 10% | 20% | 30% |
相对反应速度 | 0 | 25 | 50 | 100 | 200 | 0 | 25 | 50 | 65 | 65 |
A. 实验一中，酶浓度低于5％时限制反应速率的因素是蔗糖浓度
B. 实验二中，蔗糖浓度高于20%后限制反应速率的因素是蔗糖酶浓度
C. 两组实验的自变量不同，因变量相同
D. 如果系列实验条件温度升高5℃，相对反应速率可能降低