Question

16．如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图．请据图作答：

（1）过程①不能用人的口腔上皮细胞来完成，原因是口腔上皮细胞中的胰岛素基因不表达（转录）．
（2）与基因组文库中提取的目的基因相比，过程②的产物由于没有内含子序列，便于进行物种间的基因交流；用二苯胺（试剂）可以检验该过程产物的化学本质．
（3）在体外得到大量DNA的PCR技术，与体内DNA复制的区别之一是反应温度不同．PCR中首先用95℃高温处理，目的是使DNA解旋，而这一过程在细胞内是通过解旋酶实现的．另外，PCR过程中使用的一对引物使大量扩增出的DNA片段具有特异性．
（4）若⑥过程产生平末端，则⑦过程要用T₄DNA连接酶形成重组分子，C中标记基因的作用是用于筛选出导入了目的基因的受体细胞．

Answer 1

分析 分析题图：图示是利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图．图中①表示从胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA的过程；②为逆转录过程，A为胰岛素基因；③④⑤表示目的基因的扩增过程；⑥表示用限制酶切割运载体形成黏性末端的过程；⑦表示基因表达载体的构建过程；⑧表示将目的基因导入受体细胞的过程；⑨表示目的基因随着受体细胞的增殖和扩增；⑩是从培养液中获取胰岛素的过程．

解答 解：（1）①是获取胰岛素mRNA的过程，由于基因是选择性表达的，口腔上皮细胞中不转录出胰岛素mRNA，因此不能利用人的口腔上皮细胞来完成①过程．
（2）②是逆转录过程，其形成的DNA中没有内含子序列，这样便于进行物种间的基因交流；DNA可用二苯胺鉴定．
（3）PCR中首先用95℃高温处理，目的是使DNA解旋，而这一过程在细胞内是通过解旋酶实现的．另外，PCR过程中使用的一对引物使大量扩增出的DNA片段具有特异性．
（4）根据酶的来源不同，DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶、T₄DNA连接酶，这二者都能连接黏性末端，此外T₄DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低；C为重组质粒，其中标记基因的作用是筛选出导入了目的基因的受体细胞．
故答案为：
（1）口腔上皮细胞中的胰岛素基因不表达（转录）     
（2）内含子     二苯胺
（3）使DNA解旋     解旋酶      特异
（4）T₄DNA连接    用于筛选出导入了目的基因的受体细胞

点评 本题结合利用基因工程技术生产胰岛素的操作过程示意图，考查基因工程、细胞分化等知识，要求考生识记基因工程的工具及操作步骤，能准确判断图中各过程或物质的名称；识记细胞分化的概念，掌握细胞分化的实质，明确胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，再运用所学的知识答题．