Question

15．幽门螺杆菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素．在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养．实验基本步骤如下：配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察
请回答：
（1）在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有①脲酶，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现 ②红色环带．
（2）下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是③D灭菌．
A．高压蒸汽    B．紫外灯照射     C.70%酒精浸泡     D．过滤
（3）步骤X表示④接种．在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液⑤涂布到培养基平面上．菌液稀释的目的是为了获得⑥单菌落．
（4）在培养时，需将培养皿倒置并放在⑦恒温培养箱中．若不倒置培养，将导致⑧无法形成单菌落．
（5）临床上用¹⁴C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将¹⁴C标记的⑨尿素分解为NH₃和¹⁴CO₂．

Answer 1

分析 1、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞．微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子．
2、由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，所以可以用检测pH的变化的方法来判断尿素是否被分解，可在培养基中加入酚红指示剂，尿素被分解后产生氨，PH升高，指示剂变红．

解答 解：（1）由于细菌分解在尿素的过程中合成脲酶，脲酶将尿素分解成氨，会使培养基碱性增强，PH升高，指示剂变红．
（2）由于尿素在高温下会分解，所以对尿素溶液的灭菌要采用G6玻璃漏斗过滤的方法．
（3）在实验操作过程中要先灭菌、倒平板，再进行接种．接种时先将菌液稀释，以获得单一菌落，再涂布到培养基平面上．
（4）培养时需将培养皿倒置并放在恒温箱中培养，倒置培养的目的也是为了获得单一菌落．
（5）如果人体感染了Hp，能将尿素分解为NH₃和CO₂，因而标记尿素中的C，可通过呼吸产物来判断是否感染Hp．
故答案为：
（1）脲酶　红　
（2）D　
（3）接种　涂布　单　
（4）恒温培养箱　无法形成单菌落　
（5）尿素

点评 微生物的实验室分离是选修一的重点内容，考生需重点掌握教材的基础知识点，注意归纳总结，把握知识间的内在联系．