Question

【题目】阿拉伯胶是一种多糖，能被土壤中某些能合成阿拉伯胶降解酶的微生物分解，回答下列问题。

（1）为从土壤中分离获得能分解阿拉伯胶的单菌落，某同学设计了A、B、C、D四种培养基(成分见下表)：

培养基	阿拉伯胶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4·7H2O	KCl	FeSO4·7H2O	琼脂
A	25 g/L	－	－	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	15 g/L
B	25 g/L	－	3 g/L	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	15 g/L
C	25 g/L	3 g/L	－	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	－
D	25 g/L	3 g/L	－	1 g/L	1 g/L	0.5 g/L	0.01 g/L	15 g/L

据表判断，则应选用表中的_________培养基，针对不选用的其他培养基，分别说明原因：

①__________________________________________________________

②______________________________________________________________；

③_______________________________________________________________。

（2）为获得单菌落，可将土壤稀释液涂布接种在上述选定培养基上。在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________。在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是_________(填序号)。

①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

（3）为了确定微生物产生的阿拉伯胶降解酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g阿拉伯胶所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应在_______ ℃范围内设计后续实验。

Answer 1

【答案】 D A培养液缺少氮源 B培养液不是以阿拉伯胶为唯一碳源 C为液体培养基不能分离单菌落 培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果 ③ 45 35～45

【解析】【试题分析】

本题主要考查微生物的分离与培养的相关知识，需要考生理解所学知识：分离某些能合成阿拉伯胶降解酶的微生物时，要选用以阿拉伯胶做唯一碳源的固体培养基。同时还需掌握稀释涂布平板法分离微生物的操作原理和步骤。在此基础上结合题意，灵活运用所学知识进行综合分析并解题。

（1）分析表格中培养基的成分可知，A培养液缺少氮源，B培养液不是以阿拉伯胶为唯一碳源，C为液体培养基不能分离单菌落，所以应选用D培养基从土壤中分离获得能分解阿拉伯胶的单菌落。

（2）稀释涂布平板法接种微生物时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是如果滴加过多，则培养基表面的菌悬液会出现积液，导致菌体堆积，影响分离效果；在样品稀释过程中需要用到无菌水，在涂布平板过程中要用到酒精灯和培养皿，两个步骤中都不用显微镜，因此，在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是③显微镜。

（3）降解等量的阿拉伯胶所需的酶量越多，说明此温度下的酶的活力越小。所以三种温度中45℃条件下该酶活力最小；从三种温度下的实验结果可知，40℃下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适温度，应围绕该温度即35～45℃设计不同温度梯度，进行后续实验。