Question

（15分）某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量        。
（2）细胞培养应在含5% CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是         。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长        。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更        。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用        消化处理。
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入        ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的        或         合成水平的差异，确定Y的药效。

Answer 1

(1)多（1分）（2）维持培养液pH （3）停止 多  胰蛋白酶（4）Y    mRNA  蛋白质

解析试题分析：（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量多，因为甲细胞有很强的分裂能力。
（2）细胞培养应在含5%CO₂的恒温培养箱中进行，CO₂的作用是维持培养液pH。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长停止，正常细胞有接触抑制现象。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更多。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶消化处理。
（4）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入Y，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，保证单一变量。经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的mRNA或蛋白质合成水平的差异，确定Y的药效。
考点：本题考查动物细胞工程，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构。