题目内容

现代生物科技专题:下图为培育转基因抗虫棉的技术流程,请据图回答.

(1)质粒上标记基因的作用是
 

(2)过程①是
 
,这是基因工程的核心步骤,其目的是
 

(3)过程②采用最多的方法是
 
,检测抗虫基因是否整合到棉花细胞DNA分子上的方法是
 

(4)③过程的培养基除含有必须的营养物质、琼脂外,还需要添加
 
,④过程的实质是
 

(5)经检测抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因,该植株自交得到Fl,其中全部的抗虫植株再自交一次,后代中抗虫植株占总数的
 
考点:基因工程的应用,植物培养的条件及过程
专题:
分析:分析题图:①是基因表达载体的构建过程,②是将目的基因导入受体细胞的过程,③是脱分化过程,④是再分化过程.
解答: 解:(1)一个基因表达载体上必须具有标记基因,以便于检测目的基因是否导入受体细胞.
(2)①是基因表达载体的构建过程,这是基因工程的核心步骤,目的是使目的基因在受体细胞中能够稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用.
(3)②是将目的基因导入受体细胞的过程,在植物基因工程中常用农杆菌转化法.检测目的基因是否整合到受体细胞DNA分子中,常用DNA分子杂交技术.
(4)③是脱分化过程,决定植物脱分化的关键因素是植物激素的种类和比例,因此其培养基中还需加入植物激素.④是再分化过程,其实质是基因的选择性表达.
(5)抗虫棉细胞染色体上含有一个抗虫基因(用A表示),那么该植株可看做是杂合子(Aa),自交得到的Fl有三种基因型(AA、Aa、aa),如果其中全部的抗虫植株(1/3AA、2/3Aa)再自交一次,那么后代中不抗虫植株占2/3×1/4=1/6,抗虫植株占1-1/6=5/6.
故答案:(1)鉴别受体细胞中是否含有目的基因    (2)基因表达载体的构建  使目的基因在受体细胞中能够稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用  (3)农杆菌转化法   DNA分子杂交  (4)植物激素    基因的选择性表达  (5)5/6
点评:本题考查基因工程及基因分离定律的相关内容,意在考查考生的识记能力、识图能力和理解应用能力.
练习册系列答案
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(1)从肝细胞中分离出RNA,经
 
过程获得cDNA,再通过
 
扩增内皮抑素基因.
(2)扩增的目的基因与PUC18质粒(如图所示)都用EcoRI和BamHI进行双酶切,然后用DNA连接酶进行连接,构建重组质粒.双酶切避免了目的基因与载体间的
 
连接,提高了重组质粒的比例.
(3)大肠杆菌pUC18质粒上的LacZ基因可表达出B-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被B-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;反之,则形成白色菌落.由此推知,选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入
 
物质.成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成
 
色的菌落,原因是
 

(4)从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养,获得粗提表达产物.将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板,37℃培养.将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中,72h后在显微镜下观察细胞存活情况并
 
,实验结果 如表所示.结果说明
 

粗提表达产物浓度(μg/ml) 0 2 4 6 8 10
活的内皮细胞数目(x100) 12 6 2 1 0.5 0.5

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