题目内容

11．科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．在培养转基因番茄的过程中，下列操作不合理的是（　　）
A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
B．利用选择性培养基对构建的基因表达载体直接筛选
C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄植株

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、基因工程中获取目的基因的方法包括PCR技术体外扩增、从基因文库中获取或人工合成（如逆转录法获得目的基因），A正确；
B、构建的基因表达载体不可直接在选择培养基上进行筛选，需要先导入受体细胞中再进行筛选，B错误；
C、将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，C正确；
D、可利用低温条件对耐寒番茄进行个体性状水平的检测，筛选成功转基因的耐寒番茄植株，D正确．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．

练习册系列答案
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4．禽流感流行时，对进出某地区的人群进行体温测量的作用是（　　）
A．发现易感人群B．保护易感人群C．发现传染源D．切断传播途径
2．细胞内物质或结构的转变是维持生命活动正常进行的重要条件之一．下列相关叙述正确的是（　　）
A．ATP转变成ADP可以为生命活动直接提供能量
B．内质网膜转变成高尔基体膜有利于分泌蛋白的运输
C．肌糖原直接转变成葡萄糖有利于维持血糖的相对稳定
D．染色质转变成染色体有利于细胞中遗传物质的平均分配
19．植酸酶能提高饲料中磷的利用率，减少磷随畜禽粪便排出量，进而降低环境污染． 科学家试图将黑曲霉植酸酶基因（phyA）转入猪细胞中，以培育出转植酸酶基因猪．如图为实验过程中基因表达载体的构建过程，图中A、A1，B、B1表示引物，NheⅠ（G↓CTAGC），XhoⅠ（G↓TCGAG）为限制酶．请问答．

（1）实验室通用是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA，再通过反（逆）转录等技术形成 phyA对应的cDNA，从基因结构分析，这一cDNA比黑曲霉细胞中的phyA少启动子、终止子等结构．
（2）由图可知，科学家首先将黑曲霉植酸酶基因phyA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因 （ps）拼接在一起，其目的是使phyA基因能够在腮腺细胞中特异、高效地表达．实验室中，过程②（解链）一般可通过加热的方法完成，利用引物AI和BI的一端有部分碱基序列可以互补配对将这两个DNA片段连接起来．
（3）限制酶X ho I切割DNA形成的黏性末端可以表示为-AGCT．过程④中同时利用Nhe I酶和Xho I酶处理目的基因和运载体，其主要优点是可保证目的基因定向插入运载体中，保证目的基因能够正确表达．
（4）研究中需要将重组质粒导入受精卵，再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪，选取这类细胞作为目的基因的受体细胞的主要依据是动物受精卵具有全能性．
6．下列关于基因突变和染色体变异的叙述，正确的是（　　）
A．有丝分裂和减数分裂过程中都可能发生基因突变和染色体变异
B．染色体结构的变异都会改变染色体上基因的数目和排列顺序
C．用秋水仙素处理单倍体幼苗，得到的个体是二倍体正常植株
D．DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失一定导致基因突变
16．嫁接是我国古代劳动人民早已使用的一项农业生产技术，目前也用于植物体内物质转运的基础研究．研究者将具有正常叶形的番茄（X）作为接穗，嫁接到叶形呈鼠耳形的番茄（M）砧木上，结果见图1．请回答．

（1）上述嫁接体能够成活，是因为嫁接部位的细胞在恢复分裂、形成愈伤组织后，经细胞分化（再分化）形成上下连通的输导组织．
（2）研究者对X和M植株的相关基因进行了分析，结果见图2．由图可知，M植株的P基因发生了类似于染色体结构变异中的重复（增添）变异，部分P基因片段与L基因发生融合，形成P-L基因（P-L）．以P-L为模板可转录出mRNA，在核糖体上翻译出蛋白质，M植株鼠耳叶形的出现可能与此有关．
（3）嫁接体正常叶形的接穗上长出了鼠耳形的新叶．为探明原因，研究者进行了相关检测，结果见表．
检测对象
实验材料		M植株的叶X植株的叶接穗新生叶
P-L mRNA有无无
P-L DNA有无有
①检测P-L mRNA需要先提取总RNA，再以mRNA为模板逆转录出cDNA，然后用PCR技术扩增目的片段．
②检测P-L DNA需要提取基因组DNA，然后用PCR技术对图2中c、d（选填序号）位点之间的片段扩增．
a．Ⅰ～Ⅱb．Ⅱ～Ⅲc．Ⅱ～Ⅳd．Ⅲ～Ⅳ
（4）综合上述实验，可以推测嫁接体正常叶形的接穗上长出了鼠耳形的新叶的原因是嫁接体中P-L基因的mRNA从砧木被运输到接穗新生叶中，发挥作用，影响新生叶的形态．
3．单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）基因是最常用的“自杀”基因，其编码的胸苷激酶将原先对细胞无毒或毒性较低的药物前体，以达到杀死肿瘤细胞的目的．如图所示为HSV-TK基因导致的“自杀”原理，下列分析错误的是（　　）
A．肿瘤细胞的形成是原癌基因选择性表达的结果
B．肿瘤细胞的“自杀”现象属于细胞凋亡
C．“自杀”基因的成功表达对邻近肿瘤细胞有毒害作用
D．向肿瘤细胞中导入HSV-TK的治病方法属于基因治疗
20．细胞的生命历程就像一个电脑程序，从分裂产生，多分化、衰老、凋亡，都是正常细胞按顺序必须经过的阶段．下列有关细胞生命历程的叙述，错误的是（　　）
A．正常细胞进行有丝分裂增殖不改变遗传物质
B．通过细胞分化，可以使细胞具有更高的全能性
C．细胞核中的DNA数目不会随细胞衰老而减少
D．细胞被病毒侵染后会裂解死亡，这不一定是细胞凋亡的结果

“迷你植物”是通过植物组织培养技术，在人工控制的无菌环境下，生长在玻璃或透明塑料容器等相对密封的空间内的一系列微型植物的总称，如图甲所示。图乙是“迷你植物”组织培养过程示意图，图丙是两种植物激素对愈伤组织分化的影响示意图。回答下列问题：

（1）培育“迷你植物”的原理是植物细胞具有________，因为植物体的每一个细胞都______________。

（2）为了保证图甲中“迷你植物”的正常生长，容器内装有的凝胶状透明培养基中需要含有植物生长所需要的___________________________。

（3）培育“迷你植物”时，为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织，常常需要在配制好的培养基中添加_____________。嫩枝组织细胞接种后2～5天，若发现其边缘局部污染，可能的原因是________________________________。

（4）在图乙中，若愈伤组织没有形成根，但分化出了芽，其原因可能是培养基中______

_________________________________；若要获得更多的愈伤组织，培养基中两种植物激素的含量应该是____________________________________________________。

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