题目内容

19.回答下列有关单克隆抗体的制备和转基因动物培养的问题.
(1)某H蛋白质是一种抗原蛋白,该蛋白也是一种跨膜蛋白,其结构如图所示(抗原特性由胞外区决定).
①制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建胞外区基因,转入原核细胞表达并提纯.
②B淋巴细胞成熟于骨髓(填“器官名称”)中.
③若要制备抗H蛋白单克隆抗体,所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过H蛋白刺激的B淋巴细胞的融合而成的杂交瘤细胞.培养过程中应保持培养箱中含有5%的CO2的目的是维持培养液的pH.除了含有各种营养成分,满足适宜的温度和酸碱性外,通常还要在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防止培养过程中的污染.此外,应定期更换培养液,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害.
(2)胚胎干细胞(ES)可由囊胚的内细胞团分离培养获得,导入外源基因的干细胞经扩大培养诱导分化为早期胚胎,随后即可植入经同期发情处理的代孕雌性动物体内,获得转基因动物.

分析 1、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体.
2、胚胎移植的基本程序主要包括:①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体,有健康的体质和正常繁殖能力的受体.用激素进行同期发情处理,用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理);②配种或人工授精;③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段);④对胚胎进行移植;⑤移植后的检查.

解答 解:(1)①H蛋白是一种抗原蛋白,也是一种跨膜蛋白,且抗原特性由胞外区决定,因此制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,应构建胞外区基因,转入原核细胞表达并提纯.
②B淋巴细胞成熟于骨髓中.
③若要制备抗H蛋白单克隆抗体,所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过H蛋白刺激的B淋巴细胞的融合而成的.5%的CO2的目的是维持培养液的pH.在细胞培养液中添加一定量的抗生素,以防止培养过程中的污染.此外,应定期更换培养液,以便清除代谢产物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害.
(2)胚胎干细胞(ES)来自早期胚胎(囊胚的内细胞团)和原始性腺.胚胎移植时,需要对供体和受体进行同期发情处理,使供受体具有相同的生理状态,保证胚胎移植入相同的生理环境.
故答案为:
(1)①胞外    ②骨髓     ③H蛋白   pH    抗生素     更换培养液
(2)内细胞团     同期发情

点评 本题考查单克隆抗体的制备、胚胎移植等知识,要求考生识记单克隆抗体的制备过程;识记胚胎移植的基本程序,掌握胚胎移植的生理学基础,能结合图中信息准确答题,属于考纲识记和理解层次的考查.

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