Question

回答有关基因工程的问题：
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生

 

末端．若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生

 

（相同，不同）黏性末端的限制酶．
（2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是

 

．在用表达载体转化大肠杆菌时，常用

 

处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用

 

片段作探针与mRNA杂交．
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的

 

中，然后用该农杆菌感染植物细胞．
（4）为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是

 

．
（5）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因常作为标记基因，只有含

 

的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．形成黏性末端和平末端两种．
将目的基因导入受体细胞的方法因细胞种类不同而不同，将目的基因导入微生物细胞时，常用CaCl₂处理微生物，使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞．
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．

解答： 解：（1）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种．若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生相同黏性末端的限制酶．
（2）启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质．在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca²⁺处理大肠杆菌，使大肠杆菌变成感受态细胞，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA分子杂交技术．为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成人胰岛素，常用抗原-抗体杂交技术．
（3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体的DNA上．
（4）为获得能大量产生人干扰素的转基因牛，该基因表达载体应导入的受体细胞是受精卵．
（5）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长．
故答案为：
（1）平  相同  
（2）RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA    Ca²⁺  标记的胰岛素基因
（3）T-DNA  
（4）受精卵   
（5）卡那霉素抗性基因

点评：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断．