下图为绿色荧光小鼠制备流程图.Gfp是绿色荧光蛋白基因.请分析回答:(1)构建表达载体需要的酶是: .表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp. . .终止子和复制原点等.(2)图中载体上的NEO基因是一种抗生素抗性基因.图中步骤③所用的G418 是一种抗生素.添加G418的目的是 .(3)图中所用的胚胎干细胞来自于 .(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

题目内容

下图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：

（1）构建表达载体需要的酶是：                         ，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、           、        、终止子和复制原点等。
（2）图中载体上的NEO基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418 是一种抗生素（对细胞有毒害作用），添加G418的目的是_                                  。
（3）图中所用的胚胎干细胞来自于               。
（4）图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的           位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是               。
（5）可以使用          __方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。

（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶、标记基因、启动子（2）筛选出导入目的基因的胚胎干细胞（3）早期胚胎或原始性腺（4）内细胞团同期发情处理（5）抗原-抗体杂交

解析试题分析:（1）构建表达载体需要限制性核酸内切酶进行切割，目的基因与运载体结合也离不开DNA连接酶。基因表达载体必不可少的几部分包括标记基因、启动子、终止子和复制原点等。（2）导入目的基因的会表现出抗生素的抗性来，添加G418的目的是选出导入目的基因的胚胎干细胞。（3）胚胎干细胞可从早期胚胎或原始性腺中获得。（4）囊胚期的细胞已经开始分化为内细胞团和滋养层细胞。将目的基因要注入内细胞团的位置。对代孕的母鼠要用激素处理，目的是同期发情处理，处于相同的生理状态。（5）对目的基因的检测和鉴定分为三步：首先用DNA分子杂交技术检测是否插入目的基因；其次用分子杂交技术检测是否转录出来mRNA;最后用抗原-抗体杂交技术检测是否翻译成蛋白质。
考点：本题考查了基因工程的相关知识。意在考查考生的理解能力及理论联系实际，运用所学知识解决自然界中的一些生物学问题的能力。

练习册系列答案

相关题目

回答下列与生态学有关的问题：
(1)某人将未经检疫的外来鱼类和水草大量引进某水域生态系统后，导致生物多样性下降。从种间关系的角度分析，引起这种不良后果的原因是本地原有物种和外来物种之间可能存在着__________、__________、____________的关系。
(2)某相对稳定的水域生态系统中主要有甲、乙、丙、丁、戊5个种群，各种群生物体内某重金属的含量如下表。已知水中的该重金属被生物体吸收后难以通过代谢排出体外。假设在这5个种群构成的食物网中，消费者只能以其前一个营养级的所有物种为食。

种群	甲	乙	丙	丁	戊
重金属含量 (μg/kg鲜重)	0.003 7	0.003 7	0.035	0.035	0.34

据表中数据绘出该生态系统的食物网。

腐乳是我国独有的发酵食品，是当今国际推崇的营养高效食品。某科研机构研究了腐乳生产过程中不同浓度的食盐对腐乳中氨基酸含量和pH的影响，其中部分数据如下。请回答下列问题：

后期发酵阶段腐乳氨基酸含量变化图

盐度(%) 时间(d)	5	8	11
5	6.66	6.72	6.70
10	6.63	6.62	6.68
20	4.64	6.58	6.62
30	4.61	6.56	6.58
45	4.50	6.47	6.52
60	4.11	6.44	6.50

(注：后期发酵阶段是指从腐乳装瓶后直到成熟的过程)
(1)腐乳生产过程有多种微生物的参与，其中起主要作用的是____________________。
(2)腐乳制备过程中，加盐可以________，使豆腐块变硬。
(3)由图可知，后期发酵过程中，随着时间的延长，腐乳中游离氨基酸的含量将________，蛋白质含量呈________趋势。这是由于前期发酵阶段产生了大量的________，在后期发酵阶段将豆腐中的蛋白质分解为小分子的物质。
(4)由表可知，后期发酵到60天时，盐度为________的腐乳已经腐败，说明________________________________________________________________________。
(5)综上研究结果，为了满足口味清淡消费者的需求，同时保证营养丰富、口感鲜美，在生产过程中应该使盐度控制在________左右。

下图甲表示光合作用碳反应的一些重要过程，图乙为叶肉细胞模式图（只画出两种重要的细胞器）。请据图分析回答：

图甲                           图乙
（1）图甲表示的循环，发生在图乙中的    处（填标号）。光合产物蔗糖是图乙中的     处（填标号）合成并运输至植物体各部位利用的。
（2）NADPH和ATP共有的化学元素是                          。由甲图可知，该循环过程中NADPH和ATP除了提供能量外，还分别提供了            。
（3）图甲的过程是通过设计巧妙的实验研究清楚的。科学家将小球藻装在一个密闭容器中，通过通气管向密闭容器中通入CO₂，通气管上有一个开关，可以控制CO₂的供应，密闭容器周围有光源，通过控制电源开关可以控制光照的有无。
①向密闭容器中通入¹⁴CO₂，经过不同时间的照光（数秒直至数十分钟）后，将小球藻放入沸酒精中处理，其目的是                      ，从而使小球藻中的化合物停留在碳反应的某一阶段；然后分离出各种化合物，测定其放射性。
②科学家发现光照30秒，¹⁴C出现在三碳化合物、五碳化合物、六碳化合物和七碳化合物等20余种化合物中；而当把光照时间缩短为5秒时，¹⁴C主要出现在            中（填化合物的具体名称），现已证明该化合物是CO₂中的碳首先到达的化合物。
③为探究固定CO₂的化合物，科学家改变某实验条件后，发现RuBP的含量快速升高，其改变的实验条件是                      ，由此得出固定CO₂的物质是RuBP。
（4）利用叶片作实验材料，做如下实验：
第1步：用直径1厘米的钻孔器，避开叶脉，打下小圆片10片，放于大注射器中注入水，用注射器抽去气体，当叶圆片全部下沉后连同水倒于小烧杯中，放在黑暗中备用。
第2步：另取小烧杯并加入适量NaHCO₃稀溶液，加入10片叶圆片，开始叶圆片沉在烧杯底部，置于适宜光照下一段时间，发现有叶圆片上浮。请分析叶圆片上浮的原因：                            。

从古至今，酒就与人类生活息息相关。请回答与酿酒有关的问题：
（1）人类使用酿制葡萄酒的微生物主要是酵母菌，酵母菌酒精发酵的反应式是____；进行酒精发酵一般将温度控制在                。
（2）葡萄酒呈现深红色的原因是____               。
（3）现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取的措施是          ，并接入合适的菌种。
（4）某同学人工自酿葡萄酒时，在发酵后期向发酵液中通人空气，并将发酵液置于30~35℃环境中，结果发现发酵液中有         出现，这类微生物在糖类缺乏时可以使     转化为  ，后者再转化为         。

烟草是雌雄同株植物，却无法自交产生后代。这是由S基因控制的遗传机制所决定的，其规律如下图所示（注：精子通过花粉管输送到卵细胞所在处，完成受精）。

（1）烟草的S基因分为S₁、S₂、S₃等15种，它们互为__________，这是__________的结果。
（2）如图可见，如果花粉所含S基因与母本的任何一个S基因种类相同，花粉管就不能伸长完成受精。据此推断在自然条件下，烟草不存在S基因的__________个体。
（3）将基因型为S₁S₂和S₂S₃的烟草间行种植，全部子代的基因型种类和比例为：__________。
（4）研究发现，S基因包含控制合成S核酸酶和S因子的两个部分，前者在雌蕊中表达，后者在花粉管中表达。传粉后，雌蕊产生的S核酸酶进入花粉管中，与对应的S因子特异性结合，进而将花粉管中的rRNA降解，据此分析花粉管不能伸长的直接原因是缺少__________，无法合成__________。
（5）自然界中许多植物具有与烟草一样的自交不亲和性，这更有利于提高生物遗传性状的__________，为__________提供更丰富的原材料，使之更好地适应环境。

长跑比赛中，运动员体内多种生理过程发生了改变。
（1）机体产热大量增加，通过神经调节，引起皮肤       和汗腺分泌增强，导致散热加快以维持体温的相对恒定。这一调节过程的的中枢位于        。
（2）机体大量出汗导致失水较多，刺激渗透压感受器，引起垂体释放            ，继而促进          ，以维持体内的水盐平衡。
（3）机体血糖大量消耗的主要途径是            。血糖含量降低时，胰岛A细胞分泌的胰高血糖素增加，肾上腺髓质分泌的               增加，使血糖快速补充。
（4）比赛结束后，运动员可适量补充水分以消除由于        中渗透压升高引起的渴感。

下图是显微镜下观察到的几种细胞或组织图像，请据图回答：

(1)科学家依据             将细胞分为原核细胞和真核细胞，属于原核细胞的是    (填标号)。
(2)图中能进行光合作用的是       (填标号)，A.B所示细胞都有的细胞器是         。
(3)图中能表示生命系统个体层次的是                 (填标号)。
(4)提取细胞膜时通常选用D图中的        细胞，原因是                      。
(5)将C放入1 mol/L的KNO₃溶液中，发生质壁分离和自动复原的现象，在此过程中，物质出入细胞的方式是                  。

赖氨酸是人体必需氨基酸之一，可促进人体发育、增强免疫力。乙图为赖氨酸转基因克隆牛的培育流程，其中字母表示相应的操作过程。请回答：

(1)构建基因表达载体的过程如甲图所示，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，该过程中所使用的限制酶是   和   ，除限制酶外，该过程还需要的工具酶有   。基因表达载体除图示结构外，还应含有     和    终止子等结构。
(2)为了获得较多的卵母细胞需要对供体注射                 ，卵母细胞要培养至   时期，才具备受精能力。
(3)胚胎成纤维细胞在培养过程中会出现         和           现象，分瓶时需用           处理以得到细胞悬液，进而进行   培养使细胞增殖。
(4)图乙中a、b过程利用的主要生物技术有       和            。

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