Question

赖氨酸是人体必需氨基酸之一，可促进人体发育、增强免疫力。乙图为赖氨酸转基因克隆牛的培育流程，其中字母表示相应的操作过程。请回答：

(1)构建基因表达载体的过程如甲图所示，其中Pst I、Sma I、EcoR I、Apa I为四种限制酶，该过程中所使用的限制酶是   和   ，除限制酶外，该过程还需要的工具酶有   。基因表达载体除图示结构外，还应含有     和    终止子等结构。
(2)为了获得较多的卵母细胞需要对供体注射                 ，卵母细胞要培养至   时期，才具备受精能力。
(3)胚胎成纤维细胞在培养过程中会出现         和           现象，分瓶时需用           处理以得到细胞悬液，进而进行   培养使细胞增殖。
(4)图乙中a、b过程利用的主要生物技术有       和            。

Answer 1

（1）PstⅠ   EcoRⅠ    DNA连接酶  启动子 （2）促性腺激素  减数第二次分裂中期（或MⅡ期）（3）接触抑制  贴壁生长   胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）  传代（4）DNA拼接技术（基因工程） 动物细胞核移植技术

解析试题分析：（1）PstⅠ和 EcoRⅠ基因位于目的基因的两侧，所以限制酶用PstⅠ和EcoRⅠ。基因工程中工具酶有限制酶和DNA连接酶。基因表达载体组成有启动子、终止子、标记基因和目的基因。（2）促性腺激素可促进动物排卵。卵母细胞培养到减娄第二次分裂中期才具备受精能力。（3）动物细胞培养过程中会出现细胞贴壁现象和接触抑制现象，分瓶后的培养是传代培养。（4）a过程应用了基因工程，b过程运用了核移植技术。
考点：本题考查基因工程和胚胎工程相关知识，意在考查考生识记所列知识点，并能运用所学知识做出合理的判断或得出正确的结论的能力。