7.在“绿叶中色素的提取和分离”实验中,某同学按如表中的方法步骤进行了实验.
步骤具体操作
①剪碎叶片称取适量幼嫩菠菜叶,剪碎,放入研钵中
②充分研磨向研钵中放入少许二氧化硅,再加入适量无水乙醇,然后迅速、充分地研磨
③迅速过滤将研磨液迅速倒入玻璃漏斗(漏斗基部放一张滤纸)中进行过滤;将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞紧
④制备滤纸条将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条,将滤纸条的一端剪去两角,并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线
⑤画滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画出一条细线;重复画若干次,每次待滤液干后再画
⑥分离色素将适量层析液倒入试管中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)轻轻插入层析液中(注意:不能让滤液细线触及层析液),随后用棉塞塞紧试管口
⑦观察与记录观察试管内滤纸条上出现了几条色素带,以及每条色素带的颜色;将观察结果记录下来
请分析回答:
(1)步骤②中无水乙醇的作用是提取绿叶中的色素.
(2)按照上表中方法步骤进行实验操作,该同学在步骤收集到的滤液呈浅绿色.
(3)上述实验操作中存在三处错误,请一一加以改正步骤①中应该用新鲜的绿叶(幼嫩的菠菜叶色素含量少)、步骤②中研磨时还要添加少量碳酸钙、步骤③中漏斗基部应该放一块单层尼龙布.
6.回答下列有关生物工程的问题.
Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图1(图中数字序号表示的是相关过程).

                          图1

                                  图2 
(1)在核移植前应去除卵母细胞的细胞核.
(2)过程②,重组胚胎培养到一定时期时,可从其内细胞团中分离出的ES细胞的特点是具有全能性,能够分裂和分化形成所有组织和器官.
(3)过程③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体,具体过程如图2.图中Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因,限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同.可以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列(或核苷酸序列或遗传信息)设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段.为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选,④过程采用的酶是PstI酶和EcoRI酶,⑤过程采用的酶是DNA连接酶.如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割,假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等,则形成的DNA片段有6种,其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占$\frac{1}{6}$.
(4)在ES细胞培养液中加入特定的促进分化的因子可以体外诱导定向形成造血干细胞.
(5)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验.

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