Question

12．苦荞是一种有名的经济植物，其含有的黄酮类化合物具有降血糖，血脂等功效．CHS是合成黄酮类化合物的关键酶．有人把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中，培育高产黄酮苦养品系．按图示回答：

（1）过程①中将修饰后的CHS基因与Ti质粒连接成重组Ti质粒需要的酶是限制酶和DNA连接酶．
（2）图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞的方法称为农杆菌转化法，除此以外还可以利用的方法有基因枪法、花粉管通道法．
（3）对过程②操作前，需先用Ca²⁺处理农杆菌，使其成为感受态细胞．通过该菌的转化作用使CHS基因进入苦荞体细胞并插入到细胞的染色体DNA（DNA）上．
（4）检测转基因苦荞培育是否成功，不能用抗原一抗体杂交技术进行检测的原因是转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定．

Answer 1

分析 分析题图：图示是把经修饰的CHS基因导入苦荞细胞中，培育高产黄酮苦荞品系的过程，其中①表示基因表达载体的构建过程，②表示将重组质粒导入农杆菌细胞的过程，③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞的过程．

解答 解：（1）①表示基因表达载体的构建过程，该过程首先需要用限制酶切割外源DNA和运载体，其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．
（2）将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法，图中将修饰后的CHS基因导入苦荞体细胞采用的是农杆菌转化法．
（3）将目的基因导入微生物细胞需要采用感受态细胞法，即需先用Ca²⁺处理农杆菌，使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞．通过该菌的转化用使CHS基因进入苦荞体细胞并插入到细胞的染色体DNA 上．
（4）检测转基因苦荞培育是否成功，不能用抗原--抗体杂交技术进行检测，原因是转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物，可以比较转基因苦荞与普通苦荞的黄酮类化合物含量或测定细胞中CHS含量进行鉴定．
故答案为：
（1）限制酶和DNA连接酶
（2）农杆菌转化法    基因枪法、花粉管通道法
（3）感受态    转化    染色体DNA （DNA）
（4）转基因苦荞植株与普通苦荞植株都含有黄酮类化合物     黄酮类化合物

点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤及相关细节，掌握基因工程技术的相关应用，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．