Question

3．某同学从新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌．请回答下列问题：
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的目的是保证在固体培养基上获得单菌落．
（2）制作的培养基必须使用高压蒸汽灭菌锅（填仪器名称）灭菌后才能使用．如果在配制培养基的过程中加入碳酸钙，制出的培养基就显得不透明，用这种培养基来分离纯化乳酸菌，碳酸钙起到的作用有鉴别和乳酸菌中和产生的酸（或乳酸，维持PH相对稳定）．肉眼能明显观察到菌落时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）获得的乳酸菌菌种若要采取临时保藏，首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，并在适宜的温度下培养，当菌落长成后才放入4⁰C的冰箱保存．

Answer 1

分析 （1）泡菜的制作原理
泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸．
（2）测定亚硝酸盐含量的原理
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料．将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量．
（3）泡菜的制作

解答 解：（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释；进行梯度稀释的理由是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的乳酸菌将被分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个的菌落．
（2）制作的培养基必须使用高压蒸汽灭菌锅灭菌后才能使用．在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸和利于乳酸菌的识别和分离；分离纯化时应挑选出在平板上有透明圈的菌落作为候选菌．
（3）获得的乳酸菌菌种若要采取临时保藏，首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，并在适宜的温度下培养，当菌落长成后才放入 4⁰C的冰箱保存．
故答案为：
（1）无菌水  固体   单菌落
（2）高压蒸汽灭菌锅   鉴别    乳酸菌中和产生的酸（或乳酸，维持PH相对稳定）具有透明圈
（3）固体斜面培养基    4⁰C

点评 本题主要以泡菜的制作为前提，考生微生物应用的相关知识，意在考查考生把握知识间内在联系的能力．