Question

17．科研人员利用转基因技术将乙烯形成酶（EFE）反义基因导入番茄中获得耐储存番茄．
（1）科研人员将EFE反义基因与T-DNA构建重组质粒，将番茄的愈伤组织浸入含有上述重组质粒的农杆菌菌液中，通过该菌的转化作用使EFE反义基因进入番茄细胞并插入到细胞的染色体DNA（DNA）上，将上述愈伤组织细胞进行再分化即可诱导得到试管苗．
（2）为检测耐储存番茄中EFE反义基因是否转录出mRNA，首先要从该番茄中提取mRNA，然后将放射性同位素等标记的EFE反义基因作为探针，根据是否形成杂交带进而判断EFE反义基因是否转录出mRNA，从个体生物学水平上鉴定，耐储存番茄产生的乙烯（激素）比正常的番茄少．

Answer 1

分析 1、农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）：
①农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．
②转化：目的基因插人Ti质粒的T-DNA上$\stackrel{进入}{→}$农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．
2、目的基因的检测和鉴定：
（1）分子水平上的检测  
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：（1）分析题意可知，该目的基因导入受体细胞采用了农杆菌转化法，因此需要将EFE反义基因与T-DNA构建重组质粒，再将番茄的愈伤组织浸入含有上述重组质粒的农杆菌菌液中，通过该菌的转化作用使EFE反义基因进入番茄细胞并插入到细胞的DNA上．将上述愈伤组织细胞进行再分化即可诱导得到试管苗，该过程体现了植物细胞具有全能性．
（2）为检测耐储存番茄中EFE反义基因是否转录出mRNA，首先要从该番茄中提取mRNA，然后将放射性同位素等记的目的基因（EFE反义基因）作为探针，根据是否形成杂交带进而判断EFE反义基因是否转录出mRNA．从个体生物水平上鉴定，耐储存番茄产生的乙烯（激素）比正常的番茄少．
故答案为：
（1）农杆菌    转化       染色体DNA （DNA）     再分化
（2）放射性同位素等标记      杂交带       乙烯

点评 本题考查了基因工程的有关知识，要求考生能够识掌握因工程的操作步骤，识记农杆菌转化法的过程，识记植物组织培养的过程和原理，掌握目的基因检测与鉴定的方法．