题目内容
【题目】如图所示为农杆菌转化法示意图。请回答以下问题：
（1）图中①过程用到的工具酶的特点是_________________________________。下列所示的黏性末端是由_______种限制性核酸内切酶作用产生的。
（2）图中②过程用到的工具酶是___________，该过程是基因工程最核心的步骤，即____________。
（3）图中④过程的原理是___________。
（4）检验基因工程是否成功。首先应检测___________，这是外源基因能否在真核细胞内___________的关键；其次，利用___________法检测目的基因是否转录出相应的mRNA；最后，利用抗原一抗体杂交法检测目的基因是否翻译成蛋白质。
【答案】能识别特定的脱氧核苷酸序列并且在特定位点切割DNA分子4DNA连接酶基因表达载体的构建植物细胞的全能性转基因生物的染色体上是否插入外源基因稳定遗传分子杂交
【解析】
（1）图中①过程所用的酶为限制酶，其特点是能识别特定的脱氧核苷酸序列并且在特定位点切割DNA分子。图中四个黏性末端各不相同，根据限制酶的特异性可知，这四种黏性末端是由四种不同的限制酶切割形成的。
（2）图中②过程是将黏性末端连接，形成重组质粒，需要DNA连接酶，基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。
（3）图中④过程是利用植物组织培养将外植体培养成植株的过程，原理是植物细胞具有全能性。
（4）基因工程是否成功,需要进行检测，其中分子水平的检测：第一步:转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，方法:DNA分子杂交技术，这是看外源基因能否在真核细胞内稳定遗传的关键，第二步:目的基因是否转录出了mRNA，方法:分子杂交技术，第三步:目的基因是否翻译成蛋白质，方法:从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原-抗体杂交。
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