Question

13．长木蜂有在蜂巢内储存蜂粮（主要是长木蜂咀嚼过的花粉）的习性，其储存的蜂粮在蜂室中能长期保存不变质．研究人员为筛选出蜂粮中具有抑菌作用的微生物，幵展实验如下：
（1）配置培养基．称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl等营养物质，再加入琼脂和适量的水，配置牛肉膏蛋白胨培养基，其中可提供碳源的有牛肉膏、蛋白胨．另配置适于乳酸菌生长的MRS培养基．
（2）系列稀释操作．将一批盛有9mL水的试管作灭菌处理；从三个蜂巢采集蜂粮各lg，分别加入含有9mL水的试管中混匀，可将移液管上的橡皮头按压三次（多次）（洗耳球）；移液管不能重复使用的原因除了需要避免混合上一个稀释浓度的残留液会使稀释不准确外，还有原因是不同蜂巢中的微生物可能不同．
（3）涂布、培养和计数．将各稀释浓度的试管，分别吸取0．lmL，在两种培养基上涂布均匀，并在适宜条件下培养．根据菌落的大小、颜色、厚度、边缘性状、粗糙或湿润、能否治病（至少写出三项）等特征初步判断微生物的种类．若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51种微生物生长，在MRS培养基上最多有17种微生物生长，则实际蜂粮中的微生物种类可
能（填“可能”或“不可能”）大于68种．
（4）筛选具有抑菌作用的微生物．用接种针挑取一种微生物的菌落，分别接种到富含青霉菌（A组）、枯草芽孢杆菌（B组）、啤酒酵母（C组）的培养基中，每组选取一个平板接种三个位点，实验结果见图．其中作为对照的是A1、B1、C1组；分析实验结果，对该微生物抑制作用最弱的微生物是青霉菌．

Answer 1

分析 1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用．
2、菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形状、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的颜色、（5）菌落的透明度．

解答 解：（1）分析题意可知，实验需要筛选出蜂粮中具有抑菌作用的微生物，因此培养基为固体培养基，固体培养基需要加入琼脂作为凝固剂；配置牛肉膏蛋白胨培养基，其中牛肉膏、蛋白胨可以提供碳源．
（2）微生物的分离与培养过程，关键是防止杂菌的污染，因此盛有9mL水的试管需要灭菌处理；稀释培养液时，可将移液管上的橡皮头按压三次（多次）；移液管不能重复使用的原因除了需要避免混合上一个稀释浓度的残留液会使稀释不准确外，不同蜂巢中的微生物也可能不同．
（3）菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形状、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的颜色、（5）菌落的透明度．若在牛肉膏蛋白胨培养基上最多发现有51种微生物生长，这51种微生物为需氧型微生物；而MRS培养基适于乳酸菌生长的，即该培养基筛选的微生物为厌氧型微生物，因此实际蜂粮中的微生物种类 可能大于68种．
（4）根据题意可知，“每组选取一个平板接种三个位点”，则接种的为实验组，其余为对照组，即作为对照的是A1、B1、C1组；分析实验结果，A2培养基中菌落数最少，因此对该微生物抑制作用最弱的微生物是青霉菌．
故答案为：
（1）琼脂      牛肉膏、蛋白胨
（2）灭菌    按压三次（多次）       不同蜂巢中的微生物可能不同
（3）大小、颜色、厚度、边缘性状、粗糙或湿润、能否治病       可能
（4）A1、B1、C1     青霉菌

点评 本题考查了微生物的分离与培养的有关知识，要求考生能够识记菌落的概念和特征，识记培养基的成分，掌握筛选微生物的操作流程，再结合题干信息准确答题．