题目内容
(10分)普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种,科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体,利用农杆菌转化法导入棉花细胞,成功获得转基因棉花品种,具体过程如下。请分析回答:![]()
(1)①和②过程中所用的限制性内切酶分别是 、 。
(2)基因表达载体除了图示组成外,还应有终止子和 。
(3)③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四种长度的DNA片段,则用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是 和 。
(4)④过程中利用农杆菌介导转化棉花细胞的过程中,在 溶液环境中用 酶来制备原生质体。转化后的细胞再通过 形成植物体。
(5)导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而抑制基因的表达,其意义是 。
(1)HindⅢ、BamHⅠ SmaⅠ (2)标记基因 (3)6.0kb 12.7kb (4)甘露醇(或较高渗透压) 纤维素酶和果胶酶 (2分) 植物组织培养 (5)阻止β-甘露糖苷酶合成,使棉纤维更长
解析试题分析:(1)根据图示,①中所用的限制性内切酶是HindⅢ、BamHⅠ,②中所用的限制性内切酶是SmaⅠ。(2)基因表达载体组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因。(3)根据图示,正、反义基因表达载体总长度相等,NotⅠ酶切位点在目的基因中的位置不一样,因此只用NotⅠ酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是5.95+0.05=6.0kb,9.45+3.25=12.7kb。(4)原生质层是植物细胞去壁之后的部分,而植物细胞壁的成分是纤维素和果胶,需要用纤维素酶和果胶酶,在甘露醇(或较高渗透压)溶液中来进行,不至于让原生质层失水胀破。受体细胞经过植物组织培养技术形成转基因植物。(5)因为在普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因(GhMnaA2),能在纤维细胞中特异性表达,产生的β-甘露糖苷酶催化半纤维素降解,棉纤维长度变短。而导入细胞内的反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对,从而抑制基因的表达,其意义是阻止β-甘露糖苷酶合成,使棉纤维更长。
考点:本题考查基因工程和细胞工程的应用,意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
(15分)请回答下列与物质鉴定实验和细胞膜提取实验有关的问题。
(1)填写表中的空格。
| 需鉴定的有机物 | 用于鉴定的试剂 | 反应产生的颜色 |
| 还原糖 | 斐林试剂 | A |
| 蛋白质 | B | 紫色 |
| 淀粉 | 碘—碘化钾溶液 | C |
| 油脂 | D | 橘黄色 |
②在鉴定油脂的实验中,体积分数为50%的酒精能洗去浮色的原因是_______________________________________。
③用显微镜观察到部分油脂颗粒位于花生子叶中的细胞之间,最可能的原因是_____________________________________。
(2)某研究性学习小组研究细胞膜的结构和成分时,选取哺乳动物的成熟红细胞作实验材料的原因是_____________________________。将成熟红细胞放入________中,由于渗透作用,一段时间后细胞将破裂,再用________法获得纯净的细胞膜。
(3)构成细胞膜的主要化学成分是蛋白质和脂质,请列举2例细胞膜上的蛋白质名称及作用:____________________________________。