Question

7．某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究．请回答：
（1）原生质体的分离：在无菌条件下，取烟草无菌苗的叶片，放入含有0.5〜0.6mol/L的甘露醇（维持较高渗透压）的果胶酶和纤维素酶混合液处理，经过离心纯化后获得球形原生质体．
（2）原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞．胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株．途径一：细胞团经胚、心形胚、球形胚和胚状体，最后发育成植株．途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出丛状苗，切割芽经过生根后形成完整植株．
（3）为了对烟草的某些性状进行改良，可借助基因工程方法，将外源遗传物质（DNA）导入原生质体受体，再对其进行培养获得具有特定性状的再生植株．上述操作属于植物细胞工程技术的操作过程．

Answer 1

分析 1、液体培养条件下的单细胞可依次到细胞团、球形胚、心形胚和胚状体，最后再生出完整的植株；途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出丛状苗，切割芽经过生根后形成完整植株．
2、将外源遗传物质（DNA）导入原生质体受体，需要用到基因工程．

解答 解：（1）制备菊花原生质体时需要除去细胞壁，植物细胞壁由纤维素和果胶组成，因此可以用纤维素酶和果胶酶除去植物细胞壁，0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液的作用是维持一定的渗透压，保持原生质体的形态，经过离心纯化后获得球形原生质体．
（2）原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞．胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株．途径一：细胞团经胚、心形胚、球形胚和胚状体，最后发育成植株．
（3）为了对烟草的某些性状进行改良，可借助基因工程方法，将外源遗传物质（DNA）导入原生质体受体，再对其进行植物组织培养获得具有特定性状的再生植株．植物组织培养属于植物细胞工程技术．
故答案为：
（1）甘露醇   球  
（2）球形胚   丛状
（3）基因   植物细胞

点评 本题考查植物组织培养等相关知识，要求考生熟记和掌握相关知识点的要点，能够在试题所给予的相对简单的情境中识别和使用它们，属于识记和理解层次的考查．