Question

1．如图表示基因工程中基因表达载体的构建过程，据图分析下列问题．
（1）从图中可看出，切割质粒和目的基因的限制酶是EcoRⅠ限制酶．
（2）插入的目的基因只是结构基因部分，其表达还需要调控序列，因而用作载体的质粒插入部位前须有启动子，后须有终止子．
（3）在图中右边的方框内画出甲、乙拼接后形成的重组质粒．

Answer 1

分析 基因工程又叫基因拼接技术，一般要先将目的基因与运载体结合，然后导入受体细胞中进行表达．
用到的工具有限制性核酸内切酶--“分子手术刀”、DNA连接酶--“分子缝合针”、基因进入受体细胞的载体--“分子运输车”．
基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
1、启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；
2、终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；
3、标记基因便于目的基因的鉴定和筛选．

解答 解：（1）限制酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是-G↓AATTC-，因此图中切割质粒和目的基因的限制酶是EcoRⅠ限制酶．
（2）启动子在基因的首段，它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束，因此载体中目的基因插入部位的前端须有启动子，后端须有终止子．
（3）构建基因表达载体时只需要利用DNA连接酶将图中的甲和乙黏性末端连接形成环状即可，答案见下图．
故答案为：
（1）EcoRⅠ限制酶
（2）启动子 终止子
（3）

点评 本题比较基础，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及技术，掌握基因工程的操作步骤及各步骤中的细节，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．