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Kanuma是治疗溶酶体酸性脂肪酶缺乏症一种蛋白类药物。将修饰过的Kanuma基因导入奶牛受精卵中，并在奶牛乳腺中表达。请回答：

（1）构建Kanuma基因的表达载体时，需使用的工具酶是_________________和_________________。在基因表达载体中,除含有目的基因，标记基因和复制原点外,通常还有_________________。

（2）为获得更多的受精卵,需用_________________对雌性奶牛进行处理以获得更多卵子,并在受精前对精子进行_________________处理。受精时防止多精入卵的两道屏障分别是_________________和_________________。

（3）从胚胎的_________________或原始性腺中分离出来的细胞称为ES细胞。

（4）为检测基因是否导入奶牛的受精卵中，可采用的方法是__________________________________。

练习册系列答案
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有些细菌可分解原油，从而消除有原油泄露造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中采用富集培养的方法筛选出高效降解原油的细菌、经过的一般步骤是采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定，实验过程如图13所示，请分析回答：

（1）如图甲、乙是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。

图A所示的接种方法是___________，图B所示的接种方法是___________。

（2）在筛选过程中，应将___________接种于以___________为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养培养基属于______________________培养基。

（3）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。现有 土壤浸出液，用无菌吸管吸取 液样至盛有 无菌水的试管中，依次稀释倍。各取 已稀释 倍的水样分别接种到图 的三个培养基上培养，记录的菌落数分别为 、 、 ，则每升原土壤浸出样液中菌体数为_________________。

（4）①→③重复培养的目的是_________________。

（5）为筛选出高效菌株，可比较单菌落周围透明带区域的大小。一般透明带区域越大说明该菌株降解原油的能力_________________。

（6）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整，接种前要进行__________，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在__________条件下进行。

某男性基因型为TtRr（两对基因独立遗传），他的一个精原细胞进行有丝分裂得到两个子细胞为A1和A2；另一个精原细胞进行减数第一次分裂得到两个子细胞为B1和B2，其中一个次级精母细胞再经过减数第二次分裂产生两个子细胞为C1和C2。那么，在无交叉互换和基因突变的情况下，下列说法不正确的是（ ）

A．细胞中染色体的数量关系式是A1=A2=B1+B2=C1+C2

B．染色体形态数目相同并有同源染色体的是A1和A2

C．细胞中核DNA分子数的关系式是A1=A2=B1=B2=C1+C2

D．就上述两对等位基因而言，遗传信息相同的是A1和A2、B1和B2

某科研机构研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗，对该菌引发的胃炎、胃溃疡等疾病具有较好的预防效果，其有效成分是该菌的一种表面抗原蛋白质，请回答下列问题。

（1）要获得编码该菌表面抗原的基因，可提取出该菌的mRNA，并将mRNA_________________。要大量获得表达特异抗原的基因，可采用________技术。

（2）基因工程的核心步骤是构建_________，该结构除了抗原基因（目的基因）外，还必须有启动子、终止子以及________。

（3）目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内稳定和表达的过程，称为________。在表达过程中，启动子需与______识别和结合，从而驱动转录过程。最终翻译是否成功，常用的检测方法是_________。

（4）与传统疫苗相比，基因疫苗不仅能在宿主体内较长时间存在，还可以诱导产生 ______（填“体液免疫”“细胞免疫”或“体液免疫和细胞免疫”）。基因疫苗是在基因治疗技术的基础上发展而来的，基因治疗是把________导入病人体内，使该基因表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。

研究发现，神经退行性疾病与神经元中形成的R-1oop结构有关。R-1oop结构是一种三链RNA-DNA杂合片段，由于新产生的mRNA与DNA模板链形成了稳定的杂合链，导致该片段中的非模板链只能以单链状态存在。下列叙述错误的是

A．R-1oop结构中杂合链之间通过氢键连接

B．R-1oop结构中嘌呤碱基总数与嘧啶碱基总数不一定相等

C．R-1oop结构中的DNA单链也可转录形成相同的mRNA

D．R-1oop结构的形成会影响遗传信息的表达
5．关于人类“21三体综合征”“镰刀型细胞贫血症”的叙述，正确的是（　　）
A．都是由突变基因引发的疾病
B．患者父母不一定患有该种遗传病
C．“镰刀型细胞贫血症”表现为伴性遗传
D．都可通过光学显微镜观察染色体形态和数目来检测是否患病
12．鳟鱼的眼球颜色和体表颜色分别由两对等位基因A、a和B、b控制．现以红眼黄体鳟鱼和黑眼黑体鳟鱼为亲本，进行杂交实验，正交和反交结果相同．实验结果如图所示．请回答：
（1）在鳟鱼体表颜色性状中，显性性状是黄体（或黄色）．亲本中的红眼黄体鳟鱼的基因型是aaBB．
（2）已知这两对等位基因的遗传符合自由自合定律，理论上F2还应该出现红眼黑体性状的个体，但实际并未出现，推测其原因可能是基因型为aabb的个体本应该表现出该性状，却表现出黑眼黑体的性状．
（3）为验证（2）中的推测，用亲本中的红眼黄体个体分别与F2中黑眼黑体个体杂交，统计每一个杂交组合的后代性状及比例．只要其中有一个杂交组合的后代全部为红眼黄体，则该推测成立．
（4）三倍体黑眼黄体鳟鱼具有优良的品质，但是由于三倍体鳟鱼高度不育，因此每批次鱼苗均需重新育种．其不育的原因是在减数分裂过程中，同源染色体联会紊乱，难以产生正常配子．
9．科学工作者分离得到了某生物的基因A，将其解离成两条单链，用其中一条与基因A的信使RNA杂交配对，结果如图所示，对此不合理的解释是（　　）
A．1、3、5、7部位是通过碱基互补配对连接在一起的
B．加热到一定温度可以将两条链分开
C．图中共含有核苷酸8种，碱基5种，碱基对2种
D．由于2、2、6片段无法与信使RNA结合，因此2、4、6片段属于DNA分子中的非基因片段
7．下列哪项不属于生命系统的某一结构层次（　　）
A．受精卵B．一滴池塘水
C．一粒玉米D．一个池塘中所有的鱼

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