题目内容
下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点．如图是转基因抗病香蕉的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．请回答下列问题：
（1）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是
（2）在构建含目的基因的重组质粒A时，如果使用EcoRⅠ进行酶切，则含目的基因的外源DNA 片段和质粒在DNA连接酶的作用下，至少可形成 种环状产物，因此为防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用 （限制）酶进行切割．
（3）在构建重组质粒时，应注意到不能影响质粒的 ．
（4）香蕉组织细胞具有 性，因此，可以利用组织培养技术将导入目的（抗病）基因的香蕉组织细胞培育成完整植株．图中④、⑤依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 、 ．
（5）培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加 等植物激素，其目的是诱导外植体完成④、⑤生理过程，培养成完整的植物体．
（6）如何检测目的基因是否成功导入香蕉？ ．
（1）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是
（2）在构建含目的基因的重组质粒A时，如果使用EcoRⅠ进行酶切，则含目的基因的外源DNA 片段和质粒在DNA连接酶的作用下，至少可形成
（3）在构建重组质粒时，应注意到不能影响质粒的
（4）香蕉组织细胞具有
（5）培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加
（6）如何检测目的基因是否成功导入香蕉？
考点：基因工程的原理及技术
专题：
分析：据图分析，该质粒中只有1个标记基因，所以用SmaⅠ酶切割会破坏该标记基因及目的基因；使用EcoRⅠ进行酶切，则含目的基因的外源DNA片段和质粒在DNA连接酶的作用下，会发生自身的环化；因此选用 BamhHI和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割．
图中①是构建基因表达载体；②③是利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化．
图中①是构建基因表达载体；②③是利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化．
解答：
解：（1）质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaI酶切位点，都可以被SmaI酶破环，故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA．
（2）标记基因和外源DNA目的基因中均含有EcoRⅠ酶切位点，在DNA连接酶的作用下，可形成3种环状产物，即外源DNA自身连接、质粒自身连接、外源DNA和质粒连接；构建含目的基因的重组质粒A时，选用 BamhHI和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割，这样使目的基因两端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，同理，也可以防止质粒自身环化．
（3）质粒作为运载体的条件：有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存，因此在构建重组质粒时，应注意到不能影响质粒的自我复制．
（4）图中④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化．
（5）培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加生长素和细胞分裂素．
（6）可以从个体水平鉴定图示过程最终是否取得成功，其鉴定方法为：用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫．
故答案为：
（1）如果使用使用SmaI酶切割，将会破坏质粒的抗性基因（标记基因），同时也会破坏目的基因片段．
（2）3 BamH I 和HindⅢ
（3）复制
（4）全能 脱（去）分化 再（促）分化
（5）生长素、细胞分裂素 （顺序可以颠倒）
（6）检测抗病虫基因在转基因香蕉植株上是否成功表达（用虫子感染转基因香蕉，观察其是否抗虫）
（2）标记基因和外源DNA目的基因中均含有EcoRⅠ酶切位点，在DNA连接酶的作用下，可形成3种环状产物，即外源DNA自身连接、质粒自身连接、外源DNA和质粒连接；构建含目的基因的重组质粒A时，选用 BamhHI和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割，这样使目的基因两端的黏性末端不同，可以防止含目的基因的外源DNA片段自身环化，同理，也可以防止质粒自身环化．
（3）质粒作为运载体的条件：有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存，因此在构建重组质粒时，应注意到不能影响质粒的自我复制．
（4）图中④和⑤表示植物组织培养，原理是香蕉组织细胞具有全能性，其中④表示脱分化，⑤表示再分化．
（5）培养皿中的培养基除添加营养物质外，还需要添加生长素和细胞分裂素．
（6）可以从个体水平鉴定图示过程最终是否取得成功，其鉴定方法为：用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫．
故答案为：
（1）如果使用使用SmaI酶切割，将会破坏质粒的抗性基因（标记基因），同时也会破坏目的基因片段．
（2）3 BamH I 和HindⅢ
（3）复制
（4）全能 脱（去）分化 再（促）分化
（5）生长素、细胞分裂素 （顺序可以颠倒）
（6）检测抗病虫基因在转基因香蕉植株上是否成功表达（用虫子感染转基因香蕉，观察其是否抗虫）
点评：本题以抗病香蕉味素材，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，意在考查考生的理解能力、识记能力和应用能力．
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小学数学口算题卡脱口而出系列答案
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